Glyukoza oksidaza glyukoza miqdorini aniqlash usuli

Usulning printsipi. Usul glyukoza oksidaza fermenti ta'sirining o'ziga xos xususiyatlariga asoslangan. Ushbu ferment glyukozani molekulyar kislorod ishtirokida oksidlaydi, glyukonolakton hosil bo'ladi, o'z-o'zidan glyukon kislotasiga gidrolizlanadi. Glyukoza oksidaza glyukoza oksidlanib, vodorod peroksidini hosil qiladi (H₂Oh₂) peroksidaza ta'sirida 4-aminoantipirin va fenol bilan reaksiyaga kirishadi. Natijada, 510 nm optik zichligi namunadagi glyukoza kontsentratsiyasiga mutanosib bo'lgan pushti rangli birikma hosil bo'ladi.

glyukoza + O₂ + H₂Oh → glyukon kislotasi + H₂Oh₂

2 N₂Oh₂ + 4-aminoantipirin + fenol → quinonimin + 4H₂Oh

Uskunalar CPK, santrifuga, termostat, tokchalar, sinov naychalari, pipetkalar, biologik material, ishchi eritmadagi reagentlar.

tajriba namunasi, ml

standart namuna, ml

bo'sh sinov (N₂O), ml

Glyukoza kalibrlash eritmasi (ma'lumotnoma)

Naychalar termostatda 37 ° C da 15 minut davomida inkubatsiya qilinadi, so'ngra bo'sh namunaga (N) qalinligi 5 mm bo'lgan kupletlarda yashil filtr bilan o'lchanadi.₂O). Inkubatsiyadan keyin 1 soat davomida pushti rang barqaror.

Hisoblash glyukoza miqdori quyidagi formula bo'yicha ishlab chiqariladi:

C =x C standart qaerda

S - eksperimental namunadagi glyukoza miqdori, mol / l,

Eop - namunaning optik zichligi,

Ovqatlanish - kalibrlash namunasining optik zichligi,

S standarti - kalibrlash eritmasidagi tarkib, mol / l.

Oddiy ko'rsatkichlar:  yangi tug'ilgan chaqaloqlar - 2,8-4,4 mmol / l

Bolalar - 3,9-5,5 mmol / l

Kattalar uchun - 3,9 - 6,2 mmol / l

Gipoglikemiya (GHC).Qon shakarining ko'payishi ko'plab sabablarga ko'ra yuzaga keladi, unga ko'ra giperglikemiyaning ikki guruhi ajralib turadi.

1. Insular - tanadagi insulin etishmovchiligi yoki uning ta'sirining samarasi bilan bog'liq.

2. Qo'shimchalar (ekstrasensular) - insulin ta'siriga bog'liq emas.

HHC hosil bo'lishida quyidagi jarayonlar eng muhimdir: glikogenning parchalanishi, neoglukogenezning kuchayishi, glikogen sintezining susayishi, gormonal insulin antagonistlari ta'siri ostida to'qima glyukozasi kamayishi: somatotropin, glyukortikoidlar, tiroksin, tirotropin.

Alimentar giperglikemiya qondagi glyukoza miqdorining haddan tashqari ko'payishi bilan kuzatiladi (masalan, giperglikemiya qand moddasi bilan). Gepatik giperglikemiya jigarning diffuz shikastlanishlarida uchraydi.

Doimiy va og'ir giperglikemiya ko'pincha diabetga hamroh bo'ladi. Insulinga bog'liq diabet va insulinga bog'liq bo'lmagan diabet yoki, mos ravishda, I tip diabet va II turdagi diabet bilan ajratish odatiy holdir. I tipdagi diabetning shakllanishi asosan insulin sintezi va metabolizmining buzilishi bilan bog'liq.

Giperglikemiyaning ikkinchi guruhi asosan gormonlar ishlab chiqaradigan endokrin bezlarning giperfunktsiyasi - insulin antagonistlari bilan bog'liq. Bu Itenko-Kushing sindromi va kasalligi, akromegali, tirotoksikoz, feokromotsitoma va glyukomoma kabi kasalliklarda kuzatiladi. Jigarning ayrim kasalliklari (xususan, jigar sirrozi bilan og'rigan bemorlarning 10-30 foizida), gemoxromatoz (jigar pigmentli jigar sirrozi, bronza diabet) bilan qon glyukoza darajasi oshadi.

Gipoglikemiya (GPG) - qon glyukozasining pasayishi - ko'pincha qondagi insulin miqdorining mutlaq yoki nisbiy ko'payishi bilan bog'liq. O'tkir va surunkali gepatit, siroz, jigarning o'tkir va subakut distrofiyasi, alkogol bilan zaharlanish, arsenik bilan zaharlanish, fosfor, uzoq muddatli obstruktiv jigar va jigarda glikogenoliz va glikoneogenez jarayonlarining og'irligi o'rtasidagi nomutanosiblik natijasida ekstrapankreatik gipoglikemiya qayd etiladi. . Qon glyukoza kontsentratsiyasining pasayishi ko'pincha qizilo'ngach saratoni va oshqozon osti bezi tashqarisida joylashgan mahalliy xavfli o'smalar (fibroma, fibrosarkoma, nevoma) bilan og'rigan bemorlarda, shuningdek, qusish, anoreksiya, jigar diabet, uremiya, homilador ayollarda profilli laktatsiya va glyukozuriya bilan og'rigan bemorlarda kuzatiladi.

Gipoglikemiya markaziy bo'lishi mumkin aqliy travma, ensefalit, subaraknoid qonash, miya shishi.

1. Uglevodlarni hazm qilishning irsiy kasalliklari.

2. Giperglikozemiyaning qanday turlari sizga ma'lum?

3. Patologik giperglikozemiyaning sabablari nimada?

4. Qandli diabetning insulinga bog'liq sababi nima?

5. Irsiy kasalliklarning biokimyoviy sabablari nimada: a) glikogenoz? b) aglikogenoz? v) fruktozemiya? d) galaktozemiya?

6. Ro'za paytida uglevod almashinuvidagi biokimyoviy o'zgarishlar qanday?

7. Glyukoza bardoshliligini aniqlash usulining printsipi.

Glyukoza oksidaza usuli qachon buyuriladi?

Ushbu test buzilgan shakarga bardoshlilikni va prediabetning rivojlanishini aniqlashda, shuningdek kasallikning balandligida. Ammo bunday maqsadlar uchun tahlil kamdan-kam qo'llaniladi, chunki bu uning yuqori narxi va natijani uzoq kutish bilan bog'liq. Ko'pincha ushbu usul yordamida qon va siydikda glyukozani aniqlash quyidagi kasalliklarni differentsial tashxislashda qo'llaniladi:

Shakar darhol kamayadi! Vaqt o'tishi bilan qandli diabet ko'rish, teri va sochlarning holati, oshqozon yarasi, gangrena va hatto saraton o'smalari kabi ko'plab kasalliklarga olib kelishi mumkin! Odamlar shakar darajasini normallashtirish uchun achchiq tajribaga o'rgatdilar. Davomini o'qish.

• laktoza intolerans sindromi,
• fruktoza intoleransi,
• fruktoza tana suyuqliklari bilan chiqarilishi,
• siydikda pentoza kontsentratsiyasining ortishi.

Glyukoza oksidaza sinovining shubhasiz ustunligi uning aniqligi.

Ushbu usulning asosi nima?

Qonda glyukoza konsentratsiyasini aniqlash uchun turli xil usullar mavjud, ammo glyukoza oksidaza eng aniq hisoblanadi. Bu shakarning atmosfera kislorod bilan o'zaro ta'siri paytida reagentning oksidlanishiga asoslanadi. Vodorod periks eritmaga chiqariladi. Ushbu modda rangli birikma hosil qilish uchun ortotoluidin bilan o'zaro ta'sir qiladi. Ushbu reaktsiyaning xatti-harakati uchun maxsus fermentlarning mavjudligi zarur. Oksidlanish reaktsiyasi paytida glyukoza oksidaza, suyuqlikni bo'yashda esa peroksidaza bo'lishi kerak. Eritmaning rang intensivligi glyukoza tarkibiga bog'liq bo'ladi va uning yuqori tarkibiga ega bo'lganida eng qizg'in bo'ladi.

Glyukoza oksidazini glyukoza aniqlashning mohiyati

Natijani baholash xuddi shu vaqt oralig'idan keyin fotometriyaning miqdoriy usuli yordamida amalga oshiriladi. Tanlangan shakar normasini o'z ichiga olgan kalibrlash eritmasidan foydalanish majburiydir va shundan boshlab siz tanadagi suyuqliklarda, ko'pincha qondagi glyukoza kontsentratsiyasini baholashingiz mumkin.

Tahlil qanday o'tkaziladi?

Material bemordan bo'sh qoringa olinadi. Sinov uchun 5 ml miqdorida venoz qon ishlatiladi. Tashxis qo'yish arafasida bemorga qattiq ovqatlanish ko'rsatiladi. Bu natijaning ishonchliligini baholashga imkon beradi va tahlil xatolarini istisno qiladi. Qonni olishdan 2 kun oldin, bemor spirtli ichimliklar va chekishni tashlashning yomon odatlaridan voz kechishi kerak. Shuningdek, haddan tashqari shirin taomlarni iste'mol qilishni cheklash va iloji boricha stressli vaziyatlardan qochish kerak.

Shakar bilan plazmani olish uchun qon santrifüjlanadi.

Ko'pincha glyukoza kontsentratsiyasini aniqlashning ushbu usuli santrifugatsiya yordamida amalga oshiriladi, bunda shakllantiruvchi elementlar izolyatsiya qilinadi. Qon plazmasida shakar miqdori allaqachon aniqlangan. Unga barcha kerakli reagentlar qo'shilganda, agar rang xona haroratida o'tkazilsa, 20 daqiqadan keyin rang kuzatiladi. Glyukozani hisoblash kalibrlash jadvaliga yoki porsiya qoidalariga muvofiq amalga oshiriladi.

Tadqiqot reagentlari

Shakarni aniqlash uchun qondagi glyukoza miqdorini aniqlash uchun ekspress usullardan foydalanish eng qulaydir. Bu foydalanish qulayligi va tezkor natijalarga bog'liq. Bundan tashqari, bemorga laboratoriya yoki kasalxonaga borish shart emas. Ammo glyukoza oksidaza sinovidan farqli o'laroq, bunday tashxis ishonchsizdir. Glyukozani boshqa shakarlardan ajratib turmagani va ularning konsentratsiyasini birgalikda aniqlagani uchun.

Glyukoza oksidaza reaktsiyasining asosi 9% natriy xlorid eritmasi va 50% rux sulfatdir. Ular qonni santrifugatsiya bosqichida qo'shiladi. Bundan tashqari, sirka kislotasi va natriy asetat bilan tampon eritmasi ishlatiladi. Titrlash usuli uning pH miqdorini 4,8 darajasida aniqlaydi. Shundan so'ng, glyukoza oksidaza qo'shiladi, buning natijasida vodorod peroksid va peroksidaza ajralib chiqadi, ular aniq natijaga erishish uchun eritmani kerakli konsentratsiyada bo'yashda ishtirok etadilar.

Tahlildagi normalar

Shakarni o'lchash maxsus bo'linmalarda amalga oshiriladi - litr eritmasi uchun millimol.

Bo'sh oshqozonda glyukoza oksidaza qonini tekshirish majburiydir va buning uchun plazma yoki zardobdan foydalaning. Kattalar uchun ayollar va erkaklar uchun uning miqdori 3,3-5,5 ni tashkil qiladi. 15 yoshgacha bo'lgan bolalar uchun bu ko'rsatkich biroz pastroq va 3.2-5.3 orasida. Yangi tug'ilgan chaqaloqlarda qon glyukoza 1,7-4,2 ni tashkil qiladi. Ko'rsatkichlarning oshishi qandli diabet bilan og'rigan yoki glyukoza bardoshliligi pasaygan bemorning rivojlanishi bilan kuzatiladi. Ushbu holat prediabetdir va agar o'z vaqtida davolanmasa, tez orada bu jiddiy patologiyaning rivojlanishiga olib keladi.

Hali ham diabetni davolash imkonsiz bo'lib tuyuladimi?

Siz hozir ushbu satrlarni o'qiyotganingiz sababli, yuqori qon shakariga qarshi kurashda hali g'alaba siz tomonda emas.

Siz allaqachon kasalxonada davolanish haqida o'yladingizmi? Bu tushunarli, chunki diabet juda xavfli kasallik bo'lib, davolanmasa, o'limga olib kelishi mumkin. Doimiy tashnalik, tez siyish, xiralashgan ko'rish. Ushbu alomatlarning barchasi sizga oldindan tanish.

Ammo ta'sirni emas, balki sababni davolash mumkinmi? Biz diabetning hozirgi davolanishiga bag'ishlangan maqolani o'qishni tavsiya etamiz. Maqolani o'qing >>