Genetik muhandislik insulin ishlab chiqarish

Insulin - me'da osti bezi gormonini | tartibga soluvchi | uglevod metabolizmi va normal darajadagi kazdni saqlashpaqonda. Organizmda bu gormonning etishmasligi, eng jiddiy kasalliklardan biriga olib keladi - diabet, o'lim sababi sifatida yurak-qon tomir kasalliklari va saraton kasalligidan keyin uchinchi o'rinda turadi. Insulin kichik globula | 51 ta aminokislotaning qoldiqlarini o'z ichiga olgan va ikkita disulfid ko'prigi bilan bog'langan ikkita polipeptid zanjiridan iborat protein. U bitta zanjirli xomilalik prekursor, tarkibidagi preproinsulin shaklida sintezlanadi koi markaziy signal peptidi (23 aminokislota qoldig'i) va 35 bog'lovchi peptid (C-peptid). Signal peptidi chiqarilganda hujayrada 86 aminokislotalar qoldiqlaridan proinsulin hosil bo'ladi, bunda A va B insulin zanjirlari bog'lanadi.C-neiularni disulfid rishtasi uchun $ 3 ga kerakli yo'nalish bilan ta'minlaydigan tvid. S peptidini proteolitik ajratishdan so'ng insulin hosil bo'ladi.

Qandli diabetning bir necha shakllari ma'lum. Kasalni davolash uchun bemorga insulin kerak bo'lgan (kasallikning insulinga bog'liq shakli) eng og'ir shakli, ushbu gormonni sintezlovchi hujayralarning tanlab nobud bo'lishi (oshqozon osti bezidagi Langarxans orollari hujayralari) tufayli yuzaga keladi. Insulin bilan davolash talab qilinmaydigan diabet kasalligi shakli keng tarqalgan bo'lib, uni tegishli parhezlar yordamida boshqarish mumkin. Odatda, qoramol va sigirning oshqozon osti bezi go'sht va konserva sanoatida ishlatilmaydi va gormonni olish jarayoni amalga oshiriladigan farmatsevtika kompaniyalari uchun muzlatgichli vagonlarga joylashtiriladi. 100 g cr olish uchun! Talilik insulin 800-1000 kg ozuqa zaxirasini talab qiladi

1963 va 1965 yillarda ikkala zanjirning sintezi va ularning disfididli birikmalarining insulin olish uchun bog'lanishi. AQSh, Xitoy va Germaniyada uchta tadqiqot guruhi. 1980 yilda Daniya Novo Industri kompaniyasi cho'chqa insulinini insulinga aylantirish usulini ishlab chiqdi, B zanjiridagi alaninning 30-chi qoldig'ini tronin qoldig'i bilan almashtirdi. Ikkala insulin ham faollik va ta'sir qilish davomiyligida farq qilmadi.

Insulinning genetik muhandisligi bo'yicha ishlar taxminan 20 yil oldin boshlangan. 1978 yilda rat proinsulin (AQSh) ishlab chiqaruvchi Escherichia coli shtammini ishlab chiqarish to'g'risida xabar paydo bo'ldi. Xuddi shu yili insonning individual insulin zanjirlari hujayralarda ularning sintetik genlarini ifoda etish orqali sintez qilindi.E.coli(5.11-rasm). Olingan sintetik genlarning har biri ferment genining 3'-oxiriga sozlangan (3-galaktozidaza va vektor plazmidiga kiritilgan)(pBR322).HujayralarE.colibunday rekombinant plazmidlarga aylantirilgan p-galaktozidaza va metionin qoldig'i orqali biriktirilgan A yoki B insulin peptididan tashkil topgan gibrid (kimyoviy) oqsillar ishlab chiqarildi. Kimyoviy oqsilni siyanogen bromid bilan qayta ishlashda peptid ajralib chiqadi. Biroq, hosil bo'lgan insulin zanjirlari orasidagi disulfid ko'priklarini yopish qiyin kechdi.

1981 yilda mini-C-pro-insulin bo'lgan pro-insulin sintezi amalga oshirildi, unda 35 birlik C-peptidni oltita aminokislotalar segmenti bilan almashtirildi: arg-arg-gly-ser-lys-arg va uning ifodasi ko'rsatilgan.E.coli.

1980 yilda W. Gilbert va uning hamkasblari insulin mRNKni pankreatik P-hujayrali o'simtadan ajratib oldilar va teskari transkriptazadan undan kDNK olishdi. Olingan cDNK plazmidga kiritilganpBR322E.colipenitsillinaza genining o'rta qismida. Rekombinant plazmidda proinsulin tarkibiga oid ma'lumotlar mavjud.MRNKni tarjima qilish natijasida penitsillinaza va proinsulin ketma-ketligini o'z ichiga olgan hujayralarda gibrid oqsil sintez qilindi, ular bunday oqsildan tripsin bilan hazm qilindi.

1978 yilda Akad rahbarligida Bioorganik kimyo instituti xodimlari. Yu. A. Ovchinnikov, neyropeptidlar sintezini kodlovchi ikkita tizimli gen sintez qilindi:leytsin-ensefalin va bradikinin.Sintez qilingan lösin enkefalin genining ikkita "yopishqoq" uchi bor edi:

Olingan sintetik gen tabiiy DNK bo'lagi bilan birga E. coli P-galaktosidaz oqsil genining promeratori va proksimal qismini o'z ichiga olgan.E.coliplazmidga

Insulin olish, gen muhandisligi usullari, Biotexnologiya - Kurs ishi

1. Insulinning tuzilishi va vazifalari 5

1.1. 5-insulin molekulasining tuzilishi

1.2. 7. Insulinning biologik ahamiyati

1.3. Insulin biosintezi 8

2. Genetik muhandislik insulin sintezi 10

2.1. Dori vositalarini sintez qilishda genetik muhandislik usullaridan foydalanish 10

2.2. Genetika muhandislik usullari 11

2.3. Genetik muhandislik insulin ishlab chiqarish 14

Matndan parcha

Bundan tashqari, ushbu ikkala komponent bir vaqtning o'zida gibrid oqsil tarkibida bo'lishi mumkin. Bundan tashqari, gibrid oqsillarni yaratishda ko'p o'lchovlilik printsipidan foydalanish mumkin - gibrid oqsilda maqsadli polipeptidning bir nechta nusxalari mavjud bo'lib, ular maqsadli mahsulotning hosildorligini sezilarli darajada oshirishi mumkin.

Buyuk Britaniyada biologik faol gormonning molekulasiga ulangan E. coli yordamida inson insulinining ikkala yo'nalishi sintez qilindi. Bir hujayrali organizm o'zining ribosomalarida insulin molekulalarini sintez qilishi uchun uni zarur dastur bilan ta'minlash, ya'ni unga gormon genini kiritish kerak.

Rekombinant insulin Rossiya Fanlar akademiyasi institutida E. coli-ning genetik muhandislik shtammlaridan foydalangan holda olingan. Gibrid prekursor oqsili ko'paygan biomassadan, miqdor bilan ifodalanadi

40. Preproinsulin o'z ichiga olgan umumiy hujayrali oqsil.

In vitro-ni in vitroga o'tkazish inivoda bo'lgani kabi bir xil ketma-ketlikda amalga oshiriladi - etakchi polipeptid parchalanadi, preproinsulin oksidlovchi sulfitoliz bosqichlarida insulinga aylantiriladi, so'ngra uchta disulfid aloqasi qayta yopilib, bog'lovchi C-peptid fermentativ izolyatsiya qilinadi. Bir qator ion almashinuvi, jel va HPLC xromatografik tozalashdan so'ng, yuqori poklik va tabiiy faollikdagi insulin olinadi.

Insulinni olish uchun 8, 9, 10 metionin qoldig'i orqali N-terminaliga biriktirilgan chiziqli proinsulin va Stafilokokk aureus oqsilidan iborat gibrid oqsilni ifoda etuvchi plazmidga kiritilgan nukleotid ketma-ketligidan foydalangan holda shtamm ishlatiladi.

Rekombinatsiya qilingan shtamm hujayralarining to'yingan biomassasini o'stirish gibrid oqsilni ishlab chiqarishni boshlaydi, uning izolyatsiyasi va ketma-ket o'zgarishi trubadagi insulinga olib keladi.

Boshqa usul ham mumkin: bakterial tizimda metionin qoldig'i orqali inson proinsulinidan va polihistidin dumidan tashkil topgan rekombinant oqsilni olish. Ni-agaroza va bromni ajratish bilan ustunlardagi xelat xromatografiyasi yordamida izolyatsiya qilingan.

Izolyatsiya qilingan oqsil S-sulfatlangan. Anion almashinadigan qatronlar va RP (teskari faza) yuqori samarali suyuqlik xromatografiyasida ion almashinadigan xromatografiya yordamida tozalangan proinsulinni xaritalash va massali spektrometrik tahlil qilish, mahalliy inson proinsulinining disulfid ko'priklariga mos keladigan disulfid ko'priklari mavjudligini ko'rsatadi.

Yaqinda genetik muhandislik tomonidan rekombinant insulin ishlab chiqarish tartibini soddalashtirishga katta e'tibor qaratildi.Shunday qilib, masalan, interleykin peptidining lizin qoldig'i orqali N-terminalga biriktirilgan proinsulindan iborat protein olishingiz mumkin.

2. Oqsil inklyuziya organlarida samarali ifodalangan va lokalizatsiya qilingan. Izolyatsiyadan so'ng insulin va C-peptid hosil qiladigan protein tripsin 5, 8, 10 bilan biriktiriladi.

Olingan insulin va C-peptid RP-HPLC tomonidan tozalanadi. Eritilgan tuzilmalarni yaratishda juda muhim ahamiyatga ega - bu tashuvchilik oqsil va maqsadli polipeptidning massalari nisbati.

Sfi I cheklash joyini olib yuradigan aminokislotali spacers va C-peptidlar va oqsil tripsinni hazm qilish uchun spacerning boshida va oxirida ikkita dumin printsipi asosida ulanadi.

Bo'linadigan mahsulotlarning HPLC C-peptidning ajralishi miqdoriy jihatdan davom etishini ko'rsatadi va bu sanoat miqyosida maqsadli polipeptidlarni ishlab chiqarish uchun multimerik sintetik genlardan foydalanishga imkon beradi.

Xulosa

Radikal, aksariyat hollarda, qandli diabet bilan og'rigan bemorlarning hayoti va mehnat qobiliyatini saqlashning yagona usuli - bu hozirgi kunga qadar insulin.

Insulinni qabul qilish va klinik amaliyotga tatbiq etishdan oldin, I toifa diabet bilan og'rigan bemorlarning kasalliklari boshlanganidan bir yoki ikki yil o'tgach, juda xunuk dietalarni qo'llaganiga qaramay, halokatli natija kutilgan edi.

I toifa diabet bilan og'rigan bemorlarga umr bo'yi insulin preparatlari bilan almashtirish terapiyasi kerak. Bir yoki boshqa sabablarga ko'ra insulinni muntazam ravishda qabul qilishni to'xtatish asoratlarning tez rivojlanishiga va bemorning tez o'limiga olib keladi.

Hozirgi kunda diabetning tarqalishi yurak-qon tomir tizimi kasalliklari va xavfli o'smalardan keyin uchinchi o'rinda turadi. Jahon sog'liqni saqlash tashkiloti ma'lumotlariga ko'ra, kattalar orasida diabetning tarqalishi dunyoning aksariyat mintaqalarida 2-5 foizni tashkil qiladi va har kuni ko'payib bormoqda.

1. yillar davomida bemorlarning soni deyarli ikki baravar ko'paydi. Sog'liqni saqlash sohasidagi sezilarli yutuqlarga qaramay, insulinga qaram bemorlarning soni har yili o'sib bormoqda va hozirda Rossiyada atigi 2 million kishi istiqomat qilmoqda.

Insulin ishlab chiqarishning eng istiqbolli usullari - bu genetik muhandislik usullari. Genetik jihatdan ishlab chiqilgan insulin A va B zanjirlarini turli xil ishlab chiqaruvchi shtammlardan foydalanib va ​​keyinchalik molekulani katlama orqali olish, so'ngra izoformlarni ajratish va E.Koli hujayralarida proinsulinni tripsin va karboksipeptidaz bilan ajratish va mahalliy insulin ishlab chiqarish orqali olinadi.

Uy sharoitida inson tomonidan ishlab chiqarilgan insulin preparatlarini ishlab chiqish, diabetga chalingan millionlab odamlarning hayotini saqlab qolish uchun rus diabetologiyasining ko'plab muammolarini hal qilishda yangi imkoniyatlarni ochib beradi.

Adabiyot

Balabolkin M.I., Klebanova E.M., Kreminskaya V.M. Qandli diabet: diagnostika va davolashning zamonaviy jihatlari / Doktor, ed. G.L. Vyshkovskiy.-2005.- M .: RLS-2005, 2004.- 960 b.

Gavrikov, A.V. Rekombinant inson interferonlari moddalarini biotexnologik ishlab chiqarishni optimallashtirish: dis. ... sham. biol. Fanlar - M, 2003 yil

Genetik jihatdan ishlab chiqilgan insulin. Bifunksionlik printsipidan foydalanib, xromatografik ajratish samaradorligini oshirish. / Romanchikov A.B., Yakimov S.A., Klyushnichenko V.E., Arutunyan A.M., Wulfson A.N. // Bioorganik kimyo, 1997 - 23, № 2

Glik B., Pasternak J. Biotexnologik usullardan foydalanishni boshqarish // B. Glik, J. Parsnip / Molekulyar biotexnologiya = Molekulyar biotexnologiya. - M.: Mir, 2002 .-- S. 517-532. - 589 b.

Glick B., Pasternak J. Molekulyar biotexnologiya. Printsiplar va qo'llash. M .: Mir, 2002 yil.

Devis R., Botshteyn D, Rot J. Genetik muhandislik usullari. Bakteriyalar genetikasi // R. Devis, D. Botshteyn, J.Rot / Per. ingliz tilidan.-M.: Mir. - 1984.- 176 b.

Ermishin A.P.Genetik jihatdan o'zgartirilgan organizmlar: Afsona va haqiqat / A.P. Ermishin // M .: Tekhnalogaliya.- 2004.- 118 b.

Farmatsevtik biotexnologiya asoslari: darslik / TP Prischep, V.S. Chuchalin, K.L. Zaykov, L.K. Mixaleva. - Rostov-Don .: Feniks, Tomsk: NTL nashriyoti, 2006 yil.

Patrushev L.I. Sun'iy genetik tizimlar. // L.I. Patrushev / M .: Nauka.- 2004 yil.

Romanchikov, A.B. Genetik jihatdan ishlab chiqilgan insulin. Bifunksionlik printsipidan foydalanib, xromatografik ajratish samaradorligini oshirish. / A.B. Romanchikov va boshqalar.

// Bioorganik kimyo. 1997. № 2. s. 23

Rybchin V.N. Genetik muhandislik asoslari // V.N. Rybchin / 2-nashr, qayta ko'rib chiqilgan. va qo'shimcha: Universitetlar uchun darslik. SPb .: SPbSTU nashriyoti. - 2002 .-- 522 s.

Schelkunov S. N. Genetika muhandisligi // Sclkunov S. N. / Novosibirsk: Sib. univ Nashriyot uyi, 2008 yil.

Shelkunov, S.N. Genetika muhandisligi: darslik. nafaqa. - 2-son, tahr., Rev. va qo'shing. - Novosibirsk: Sib. univ Nashriyot uyi, 2004 .-- 496 b.

1. Insulin molekulasida disulfid aloqalarining joylashishi.

2. Insulin molekulasida aminokislotalar qoldiqlarining joylashishi

Insulinning asosiy metabolik fermentlarga ta'siri

Jigar mushaklarining yog 'to'qimalarini faollashtirish 1. Fosfodiesteraza 1. Fosfodiesteraza 1. LP-lipaz

4. Piruvat dehidrogenaz kompleksi

4. Piruvat dehidrogenaz kompleksi

5. Fosfataza glikogen sintazasi va glikogen fosforilaza

5. Glikogen sintazasi fosfataza b. Atsetil-KoA-karboksilaza induktsiyasi 1. Glyukokinaza 1. Gliseraldegid fosfat dehidrogenaza

6. Glyukoza-6-fosfat dehidrogenaza repressiyasi Fosfoenolpiruvat karboksikaza

Shakl 3 Langerhans orollaridagi β-hujayralardagi insulin biosintezi sxemasi. ER - endoplazmatik retikulum. 1 - signal peptidini hosil qilish, 2 - preproinsulin sintezi, 3 - signal peptidining ajralishi, 4 - proinsulinni Golgi apparati orqali tashish, 5 - proinsulinni insulin va C-peptidga aylantirish va insulin va C-peptidni sekretor granulalariga kiritish, 6 - insulin sekretsiyasi va C peptid.

4. Insulinni o'zidan oldingilaridan sintez qilishning umumiy sxemasi

Shakl 5 Ikki alohida zanjir hosil bo'lishi bilan insulin sintezi

Odamning genetik muhandislik insulinini olish usuli

Ixtiro biotexnologiya sohasiga, xususan, qandli diabetni davolashda ishlatiladigan dori-darmonlarni ishlab chiqarish uchun inson tomonidan ishlab chiqarilgan insulin ishlab chiqarishga tegishli.

Usul inson proinsulini, Escherichia coli BL21 / pPINS07 (BL07) yoki Escherichia coli JM109 / pPINS07 ni o'z ichiga olgan gibrid oqsilni ishlab chiqaruvchi shtammini etishtirish orqali, gibrid oqsilni o'z ichiga olgan inklyuziya tanalarini ajratib, parchalanish orqali hujayralarni parchalash orqali amalga oshiriladi.

Keyinchalik, inklyuziya tanalarini oldindan yuvish, oqsilni bir vaqtning o'zida eritib yuborish va 5-10 mM ditiiotreitol va 1 mM EDTA bo'lgan tamponda disulfid aloqalarni tiklash, ion almashinadigan xromatografiya yordamida qayta tiklangan termoyadroviy oqsilini qayta tiklash va tozalash amalga oshiriladi.

Gibrid oqsilning parchalanishi gibrid oqsil, tripsin va karboksipeptidaz B 4000: 0.6: 0.9 ning og'irlik nisbatida tripsin va karboksipeptidaz B qo'shma gidrolizi orqali amalga oshiriladi.

Insulinni tozalash hidrofobik xromatografiya yoki teskari fazali yuqori suyuqlikli xromatografiya, so'ngra gel filtratsiyasi va rux tuzlari mavjudligida insulinni kristallanish yo'li bilan ajratish orqali amalga oshiriladi. Ixtiro genetik jihatdan ishlab chiqilgan insulin olish jarayonini qisqartirish va uning chiqishini ko'paytirish imkonini beradi.

Ixtiro biotexnologiya sohasiga, xususan, qandli diabetni davolashda ishlatiladigan dori-darmonlarni ishlab chiqarish uchun inson tomonidan ishlab chiqarilgan insulin ishlab chiqarishga tegishli.

Zamonaviy diabetologiyaning asosiy yutuqlari va Jahon sog'liqni saqlash tashkiloti tavsiyalarini hisobga olgan holda, Evropa mamlakatlari 2001 yilga kelib, inson insulinidan foydalanishga o'tishdi. Shu munosabat bilan DNK rekombinant texnologiyasi usullaridan foydalangan holda insulin ishlab chiqarish usullarini ishlab chiqish dolzarb vazifadir.

Genetik jihatdan ishlab chiqilgan inson insulinini ishlab chiqarishning ma'lum usuli, bu stafilokok oqsilining ikkita sintetik IgG sintetik IgG domenini o'z ichiga olgan proinsulin ishlab chiqaruvchi E. Coli shtammini etishtirishdan iborat.

Usul bakterial hujayralarni yo'q qilish, proinsulinni o'z ichiga olgan Torosni olish, eritilgan Torosni, proinsulinning oksidlovchi sulfitolizini, uning renatiratsiyasini, qayta tiklangan oqsilni yaqinlik xromatografiyasi bilan tozalash, Proinulinni proteolitik fermentlar bilan parchalash (tripsin va karboksipeptidaz faza-oqsilni tozalash va oqsilni tozalash bilan yakunlangan) xromatografiya (Nilson J., Jonasson P., Samuelsson E., Staxl S., Uxlen M. "Inson insulinini va uning C-peptidini integratsiyalashgan ishlab chiqarish", Biotexnologiya jurnali, 1996, v. 48, 241-250) .

Ushbu usulning kamchiliklari mahsulotning yuqori narxi va maqsadli mahsulot tarkibida bo'lishi mumkin bo'lgan insulin yuvish vositalarini ishlab chiqarishda foydalanish hisoblanadi.

Genetik jihatdan ishlab chiqilgan inson insulinini ishlab chiqarishning ma'lum usuli, bu E ishlab chiqaruvchisi shtammining hujayralarini o'stirishdan iborat.

Coli DN5 a / pVK100, ultrasonik parchalanish orqali bakterial hujayralarni yo'q qiladi, gibrid oqsilni suvda eruvchan aralashmalardan tsentrifugatsiya yo'li bilan ajratish, 8 m karbamid, 1 mM ditiyoitritol, 0,1 M Tris-HCl bo'lgan buferga qo'shilish organlarini eritib yuboradi. pH 8.0, 12-16 soat davomida.

Erimaydigan aralashmalar santrifugatsiya yo'li bilan chiqariladi, shundan keyin diyiotreitolning konsentratsiyasi 10 mM ga ko'tariladi va disulfid aloqalari 1 soat davomida 37 ° S da tiklanadi. Eritma 5 marta sovuq suv bilan seyreltildi, pH 4,5 ga o'rnatildi va cho'kindi hosil qilish uchun 2 soat davomida 4 ° C da inkubatsiya qilindi.

Gibrid oqsilni o'z ichiga olgan cho'kindi santrifüjlash bilan ajralib chiqdi va qayta tiklandi, pH 10-12 sovuq suvda tez eritildi, so'ngra 10 mM glisin tampon bilan, pH 10,8 bilan seyreltildi va kechasi 4 ° C da saqlandi. Ultrafiltratsiyadan so'ng, eritma Sefadex G-50 kolonida jel filtrlashdan o'tkazilib, 10 mM glisin tampon bilan elutatsiya qilindi.

Sintezlanadigan oqsilni o'z ichiga olgan fraktsiyalar to'planadi, ultrafilitlanadi va muzlatib quritiladi. Olingan termoyadroviy oqsil 0,08 M ​​Tris-HCl tamponida (pH 7,5) 10 mg / ml kontsentratsiyada eriydi va tripsin va karboksipeptidaza B bilan bir vaqtda yopishadi (karboksipeptidaz B nisbati: tripsin: termoyadroviy oqsil 0.3: 1: 10) 37 30 daqiqa davomida ° C.

Keyin izopropanolni 40% ga qo'shing. Aralash DEAE-Sefadeks A-25 ustuniga xromatografiya qilinadi va 0,05 M Tris-HCl buferi bilan pH 7,5, 40% izopropanol bilan 0,1 m dan 0,1 m gacha chiziqli gradient bilan izopropanol chiqarilgandan so'ng, natriy xlorid kontsentratsiyasi. 25% ga ko'taring, pH ni 2,0 ga o'zgartiring va insulin cho'kmasini to'plang.

(Chen J.-Q., Jang H.T., Hu M.-N., Tang J.G.), "Ko'rsatilganidek met-liz-odam proinsulinli E. Coli tizimida insulin ishlab chiqarish. prekursor "Amaliy biokimyo va biotexnologiya, 1995, 55-bet, 5-15-betlar).

Ushbu usulning kamchiliklari jel filtratsiyasini dastlabki bosqichlarda qo'llashni o'z ichiga oladi, bu juda ko'p miqdorda sorbent va gibrid oqsilni ajratishda ishlatiladigan ko'plab fermentlarni talab qiladi.

Genetik jihatdan yaratilgan odam insulinini ishlab chiqarishning ma'lum usuli, Escherichia coli JM109 / pPINS07 ishlab chiqaruvchisini shtammini etishtirish, bakterial hujayralarni parchalanish orqali yo'q qilish, gibrid oqsilni o'z ichiga olgan tanani ajratish, karbamid va ditiotritol, buferlash va oqsillarni tozalash Izopropanolda aralash aralashmalarning yog'ingarchilik darajasi 40%, KM-separozada xromatografiya, uning tripsin va karboksipeptidaz B bilan ketma-ket bo'linishi tripsinoliz 0,3-0,1 M ammoniy asetat tampon pH 5.0-6.0 bilan 6 M karbamid o'z ichiga olgan xromatografiya qilinadi, oqsil elutatsion natriy xloridning chiziqli gradienti bilan 0 dan 0,5 M gacha. tampon va karboksipeptidaz B bilan ajratilganidan keyin olingan insulin fraktsiyasi teskari fazali yuqori samarali suyuqlik xromatografiyasi (RP HPLC) bilan tozalangan, so'ngra jel filtrlash (Pat. RF № 2141531, MKI C12P 21/02, publ). 1999)

Usulning kamchiliklari gibrid oqsilni tozalash bosqichida ko'p miqdordagi karbamid va organik erituvchilarni iste'mol qilishni o'z ichiga oladi.

Diabet bo'yicha mutaxassis

Insulinni ishlatishdan oldin, diabet kasalligi bilan og'rigan bemorning umr ko'rish muddati 10 yildan oshmagan. Ushbu preparatning ixtiro qilinishi millionlab bemorlarni qutqardi. Insonning genetik muhandisligi insulin - bu fanning eng so'nggi yutug'i.

Ko'p yillik mehnatning natijasi

Genetik muhandislik (rekombinant) preparati ixtiro qilinishidan oldin, insulin qoramol va cho'chqalarning oshqozon osti bezidan ajratilgan.

Cho'chqa insulin va odam o'rtasidagi farq faqat bitta aminokislotadir

Preparatni olishning ushbu usulining kamchiliklari:

• biologik xom ashyoni saqlash va tashishning murakkabligi;
• chorva mollari etishmasligi
• oshqozon osti bezi gormonini ajratish va tozalash bilan bog'liq qiyinchiliklar,
• allergik reaktsiyalar xavfi yuqori.

1982 yilda bioreaktorda tabiiy inson insulinining sintezi bilan yangi biotexnologik davr boshlandi. Agar insulin terapiyasining boshlanishida olimlarning maqsadi faqat bemorning hayotini saqlab qolish bo'lgan bo'lsa, bizning davrimizda yangi dorilarni ishlab chiqish kasallikning barqaror kompensatsiyasini olishga qaratilgan. Ilmiy tadqiqotlarning asosiy maqsadi diabet bilan og'rigan bemorning hayot sifatini yaxshilashdir.

Zamonaviy texnologiyalar

Preparatning tayyorlash usuliga qarab preparatning turlari:

Giyohvand moddalarni iste'mol qilishdan keyin tanada nima sodir bo'ladi?

Hujayra membranasining retseptorlari bilan bog'lanib, insulin quyidagi jarayonlarni amalga oshiradigan kompleks hosil qiladi:

1. Hujayra ichidagi glyukoza tashishni yaxshilaydi va uning so'rilishini osonlashtiradi.
2. Glyukozani qayta ishlashda ishtirok etadigan fermentlarning chiqarilishini rag'batlantiradi.
3. Jigarda glikogen hosil bo'lish tezligini pasaytiradi.
4. Yog 'va oqsil metabolizmini yaxshilaydi.

Teri ostiga kiritilganda insulin 20-25 daqiqadan so'ng harakat qila boshlaydi. Preparatning amal qilish muddati 5 soatdan 8 soatgacha. Keyinchalik u insulinaza fermenti tomonidan ajratiladi va siydik bilan chiqariladi. Preparat yo'ldoshni kesib o'tmaydi va ona sutiga o'tmaydi.

Genetika bo'yicha insulin insulin qachon buyuriladi?

Agar shoshilinch yordam kerak bo'lsa

Genetik jihatdan ishlab chiqilgan inson insulinidan quyidagi holatlarda foydalaniladi:

1. 1-toifa yoki 2-toifa diabet. U mustaqil davolash sifatida yoki boshqa dorilar bilan birgalikda qo'llaniladi.
2. Og'izdagi gipoglikemik vositalarga qarshilik bilan.
3. Homilador ayollarda diabet bilan.
4. Agar buyrak va jigar asoratlari bo'lsa.
5. Uzoq vaqt davomida ishlaydigan insulinga o'tish paytida.
6. Operatsiyadan oldingi davrda.
7. Hayot uchun xavfli bo'lgan holatlarda (giperosmolyar yoki ketoatsidotik koma).
8. Favqulodda vaziyatlarda (tug'ilishdan oldin, jarohatlar bilan).
9. Agar terining distrofik shikastlanishi bo'lsa (oshqozon yarasi, furunkuloz).
10. INFEKTSION fonida diabetni davolash.

Insonning genetik muhandisligi insulin yaxshi muhosaba qilinadi va allergik reaktsiyalarga olib kelmaydi, chunki u tabiiy gormon bilan mutlaqo bir xil.

Doimiy monitoring muhim!

Quyidagi hollarda dori-darmonlarni buyurish taqiqlanadi:

• qon shakarini tushirish
• preparatga yuqori sezuvchanlik.

Preparatni tayinlashdan keyingi dastlabki kunlarda bemorni diqqat bilan kuzatib borish kerak.

Yon ta'siri

Urticaria xavfli! Quincke shishi!

Kamdan kam hollarda, insulin ishlatilganda quyidagi asoratlar yuzaga kelishi mumkin:

• allergik reaktsiyalar (ürtiker, Quincke shishi, terining qichishi),
• qon shakarining keskin pasayishi (organizm tomonidan preparatni rad etish yoki immunologik ziddiyat tufayli rivojlanadi),
• buzilgan ong
• og'ir holatlarda gipoglikemik komaning rivojlanishi mumkin,
• tashnalik, quruq og'iz, letargiya, ishtahani yo'qotish,
• giperglikemiya (preparatni infektsiya yoki isitma fonida ishlatganda),
• yuzning qizarishi
• qo'llash sohasidagi mahalliy reaktsiyalar (yonish, qichishish, atrofiya yoki teri osti yog'ining ko'payishi).

Ba'zida preparatga moslashish shishish va ko'rish buzilishi kabi kasalliklarga hamroh bo'ladi. Ushbu namoyonlar odatda bir necha haftadan keyin yo'qoladi.

Dorixonada genetik jihatdan yaratilgan insulinni qanday topish mumkin?

Tibbiyot parenteral yuborish uchun eritma shaklida mavjud:

Bemorning individual xususiyatlarini inobatga olgan holda insulin preparatini tanlash qiyin emas.

Foydalanish shartlari

Ko'pincha insulinni teri ostiga yuborish qo'llaniladi.

Shoshilinch holatlarda preparat vena ichiga yuboriladi.

Bemorning og'ir ahvolida

Hatto tajribaga ega diabet kasalligi ham preparatni qo'llashda xatoga yo'l qo'yishi mumkin.

Asoratlarni oldini olish uchun quyidagilar zarur:

1. Ishlatishdan oldin, preparatning yaroqlilik muddatini tekshiring.
2. Saqlash bo'yicha tavsiyalarga amal qiling: zaxira flakonlar muzlatgichda saqlanishi kerak. Ishlab chiqilgan flakon xona haroratida qorong'i joyda saqlanishi mumkin.
3. To'g'ri dozani eslab qolishingizga ishonch hosil qiling: shifokorning ko'rsatmasini yana o'qing.
4. In'ektsiyadan oldin shpritsdan havo bo'shatish kerak.
5. Teri toza bo'lishi kerak, ammo uni qayta ishlash uchun spirtli ichimliklarni iste'mol qilish maqsadga muvofiq emas, chunki bu preparat samaradorligini pasaytiradi.
6. Inyeksiya uchun eng yaxshi joyni tanlang. Qorinning terisi ostiga kiritilganda, preparat tezroq harakat qiladi. Gluteal katlama yoki elkaga kiritilganda insulinni sekinroq singdirish.
7. Butun sirt maydonini ishlating (mahalliy asoratlarni oldini olish). Enjeksiyonlar orasidagi masofa kamida 2 sm bo'lishi kerak.
8. Mushak ichiga tushish xavfini kamaytirish uchun terini krem ​​ichida ushlang.
9. Dori oqib ketmasligi uchun shpritsni teri ostiga bir burchak ostida AOK qiling.
10. Oshqozonga kiritilganda, qisqa muddatli insulin ovqatdan 20 daqiqa oldin yuboriladi. Agar elka yoki dumba tanlansa - ovqatdan o'ttiz daqiqa oldin.

Boshqa dorilar bilan kombinatsiya

Ko'pincha diabet bilan og'rigan bemor bir nechta dori-darmonlarni qabul qiladi. Boshqa dorilar bilan kombinatsiyasi genetik jihatdan ishlab chiqilgan insulinning terapevtik ta'siriga ta'sir qilishi mumkin.

Asoratlarni oldini olish uchun siz quyidagilarni bilishingiz kerak.

Dozani oshirib yuborish

Ba'zi hollarda insulinni yuborish qon shakarining keskin pasayishiga olib keladi. Muammo ko'pincha dozani noto'g'ri tanlash tufayli yuzaga keladi.

Gipoglikemiyaning dastlabki belgilari:

• zaiflik
• terining rangsizlanishi
• tashvish holati
• bosh aylanishi
• buzilish
• qo'llar, oyoqlar, til va lablarning noaniqligi,
• oyoq-qo'llarining qaltirashi
• sovuq ter
• kuchli ochlik hissi
• bosh og'rig'i.

Tremor; farovonlikning to'satdan yomonlashishi

Agar o'zingizda bunday alomatlarni sezsangiz, tez hazm bo'ladigan uglevodlarni o'z ichiga olgan narsani tezda iste'mol qilishingiz kerak. Bu pishiriqlar, shakarlamalar, shakar bo'lagi yoki oq non bo'lishi mumkin. Shirin choy bunday vaziyatlarda yordam beradi.

Agar ahvol yomonlashsa, tez yordam chaqirishingiz kerak. Gipoglikemiya komaga yoki bemorning o'limiga olib kelishi mumkin.

Rekombinant insulin xavfli emasmi?

Salom Rekombinant insulin tabiiydan farq qilmaydi. Uni olish uchun genetik modifikatsiyalangan bakteriyalar qo'llaniladi.

Genetik muhandislik texnologiyalaridan foydalanib, insulin genini o'z ichiga olgan rekombinant DNK E. coli hujayrasiga joylashtiriladi. Genetik jihatdan o'zgartirilgan organizmlar ko'payadi va gormon ishlab chiqaradi. Preparat juda samarali va yuqori darajada tozalashga ega.

Insulin II qism. Mikrobiologik insulin ishlab chiqarish

o'xshashlik komponenti - gibrid oqsilni ajratishni sezilarli darajada osonlashtiradi.

Bunday holda, ikkala komponent bir vaqtning o'zida gibrid oqsil tarkibida bo'lishi mumkin.

Bundan tashqari, gibrid oqsillarni yaratishda ko'p o'lchovlilik printsipidan foydalanish mumkin (ya'ni maqsadli polipeptidning bir nechta nusxasi gibrid oqsilda mavjud), bu maqsad qilingan mahsulotning hosildorligini sezilarli darajada oshirishi mumkin.

2. E. ichak koli hujayralarida proinsulinning namoyon bo'lishi.

Asarda mualliflar chiziqli proinsulin va N-terminaliga metionin qoldig'i orqali biriktirilgan Stafilokokk aureus oqsilining bir qismidan tashkil topgan gibrid oqsilni ifoda etuvchi plazmidga kiritilgan nukleotidlar qatoriga ega JM 109 N1864 shtammini qo'lladilar.

Rekombinatsiya qilingan shtamm hujayralarining to'yingan biomassasini o'stirish gibrid oqsilni ishlab chiqarishni boshlaydi, uning izolyatsiyasi va ketma-ket o'zgarishi trubadagi insulinga olib keladi.

Boshqa tadqiqotchilar guruhi metinsin qoldig'i orqali inson proinsulinidan va polihistidin dumidan iborat sintezning bakterial ekspress tizimida rekombinant oqsilni olishdi. Ni-agaroza ustunlaridagi xelomatik xromatografiya yordamida qo'shma jismlardan ajratib olingan va siyanogen bromid bilan hazm qilingan.

Anion almashinadigan qatronlar va RP (teskari fazali) HPLC (ion almashtirish xromatografiyasi) orqali ion almashinadigan xromatografiya yordamida tozalangan proinsulinni xaritalash va massali spektrometrik tahlil qilish, mahalliy inson proinsulinining disulfid ko'priklariga mos keladigan disulfid ko'priklari mavjudligini ko'rsatdi. Hujjatda prokaryotik hujayralarda genetik muhandislik tomonidan insulin ishlab chiqarishning yangi, takomillashtirilgan usulini ishlab chiqish to'g'risida xabar berilgan. Yozuvchilar paydo bo'lgan insulinni uning tuzilishi va biologik faolligi oshqozon osti bezidan ajratilgan gormon bilan bir xil ekanligini aniqladilar.

Yaqinda genetik muhandislik tomonidan rekombinant insulin ishlab chiqarish tartibini soddalashtirishga katta e'tibor qaratildi. Shunday qilib, mualliflar lizin qoldig'i orqali proinsulin N-terminaliga biriktirilgan interleykin 2 ning etakchi peptididan iborat termoyadroviy oqsilini olishdi.

Protein samarali ifoda etilgan va inklyuziya organlarida lokalizatsiya qilingan. Izolyatsiyadan keyin protein insulin va C-peptid hosil qilish uchun tripsin bilan hazm qilindi. Boshqa tadqiqotchilar guruhi xuddi shunday harakat qilishdi.

Proinsulin va stafilokokkning ikkita sintetik maydonidan tashkil topgan termoyadroviy protein IgG ni bog'laydigan tanalarga joylashtirilgan, ammo yuqori darajada ifoda etilgan. Oqsil IgG yordamida yaqinlik xromatografiyasi bilan ajratilib, tripsin va karboksipeptidaz B bilan qayta ishlandi.

Olingan insulin va C-peptid RP HPLC tomonidan tozalangan. Eritilgan konstruktsiyalarni yaratishda tashuvchi oqsil va maqsadli polipeptidning massa nisbati juda katta.

Shunday qilib, ish termoyadroviy konstruktsiyalarni tasvirlaydi, bu erda odam zardobidagi albuminni bog'laydigan protein tashuvchi polipeptid sifatida ishlatilgan. Unga bitta, uch va ettita S-peptidlar biriktirilgan edi.

S-peptidlar Sfi I cheklov uchastkasini olib boradigan aminokislotali kosmik biriktirgichlar va spacerning boshida va oxirida tripsin bilan oqsilni keyinchalik parchalash uchun ikkita arginin qoldig'idan foydalanib, dum asosiga ulangan. Bo'linish mahsulotlarining HPLC C-peptidning ajralishi miqdoriy ekanligini ko'rsatdi va bu sanoat miqyosida maqsadli polipeptidlarni olish uchun multimerik sintetik genlardan foydalanishga imkon beradi.

Ishda Arg32Tyr o'rnini bosuvchi proinsulin mutantini tayyorlash tasvirlangan. Ushbu oqsil tripsin va karboksipeptidaz B bilan birlashtirilganida, mahalliy insulin va tirozin qoldig'ini o'z ichiga olgan C-peptid hosil bo'lgan. Ikkinchisi, 125I etiketlanganidan so'ng, radioimmunoassayda faol foydalaniladi. 3 Insulinni tozalash.

Dori-darmonlarni ishlab chiqarish uchun mo'ljallangan insulin yuqori darajada toza bo'lishi kerak. Shuning uchun ishlab chiqarishning har bir bosqichida olingan mahsulotlarning tozaligini yuqori samarali nazorat qilish zarur. Ilgari, RP va IO (ion almashinuvi) HPLC, proinsulin-S-sulfonat, proinsulin, A- va B-zanjirlarni va ularning S-sulfonatlarini tavsiflash uchun ishlatilgan.

Shuningdek, flüoresan insulin lotiniga alohida e'tibor beriladi. Asarda mualliflar inson insulinini ishlab chiqarishning barcha bosqichlarida mahsulotlarni tahlil qilishda xromatografik usullarning qo'llanishi va informatsionligini o'rganib chiqdilar va natijada olingan mahsulotlarni samarali ajratish va tavsiflash uchun xromatografik operatsiyalar jadvalini tuzdilar.

Bundan tashqari, insulinning tozaligi va miqdorini aniqlash jarayonlarini avtomatlashtirish va tezlashtirish uchun yondashuvlar ishlab chiqilmoqda.

Ishda insulinni aniqlash uchun elektrokimyoviy aniqlash bilan RP suyuq xromatografiyasidan foydalanish imkoniyatlarini o'rganish bo'yicha tadqiqotlar va Langerhans orolidan ajratilgan insulinni immunoaffiniy xromatografiyasi yordamida spektrometrik aniqlash yordamida aniqlash metodologiyasi ishlab chiqilgan.

Ishda tezkor insulin mikrodeterminatsiyasini lazer floresansi yordamida kapillyar elektroforez yordamida qo'llash imkoniyati o'rganildi. Tahlil namunaga feniliziotsianat (FITC) bilan belgilangan ma'lum miqdordagi insulin va monoklonal insulin antikorlarining Fab qismini qo'shish orqali amalga oshiriladi. Yorliqli va muntazam insulinlar Fab kompleksi bilan raqobatdosh munosabatda bo'lishadi. FITZ bilan belgilangan insulin va uning Fab bilan biriktirilgan tarkibi 30 sekundda ajralib chiqadi.

So'nggi paytlarda ko'plab ishlar insulin ishlab chiqarish usullarini takomillashtirishga, shuningdek uning asosida dozalash shakllarini yaratishga bag'ishlandi.

Masalan, Amerika Qo'shma Shtatlarida gepatoseptik insulin analoglari patentlangan, ular A zanjirining 13-15 va 19 pozitsiyalarida va B zanjirining 16 pozitsiyasida turli xil aminokislotalar qoldiqlari kiritilishi sababli tabiiy gormondan tarkibiy jihatdan farq qiladi.

Olingan analoglar qandli diabetni davolashda turli xil parenteral (tomir ichiga, mushak ichiga, teri ostiga), intranazal dozaj shakllariga yoki maxsus kapsulalar shaklida implantatsiyadan foydalaniladi. In'ektsiyasiz yuboriladigan doz shakllarini yaratish alohida dolzarblik hisoblanadi.

Maqolada proteolitik ferment ingibitorlari bilan modifikatsiyalangan polimer gidrojel hajmida immobilizatsiya qilingan insulin mavjud bo'lgan og'iz orqali yuborish uchun makromolekulyar tizim yaratilishi haqida xabar berilgan. Bunday preparatning samaradorligi teri ostiga kiritilgan mahalliy insulin samaradorligining 70-80% ni tashkil qiladi.

Boshqa bir ishda, preparat bog'lovchi vosita ishtirokida 1-4: 100 nisbatida olingan qizil qon hujayralari bilan insulinni bir martalik inkubatsiya qilish yo'li bilan olinadi.Mualliflarning faolligi 1000 dona / g bo'lgan preparatning qabul qilinganligi, og'iz orqali yuborilganidan keyin to'liq saqlanib qolishi va bir necha yil davomida lyofilizatsiyalangan shaklda saqlanishi haqida xabar berilgan.

Insulinga asoslangan yangi dorilar va dozalash shakllarini yaratish bilan bir qatorda, diabet muammosini hal qilish uchun yangi yondashuvlar ishlab chiqilmoqda.

Shunday qilib, mualliflar GLUT2 glyukoza tashuvchisi oqsil kDNNasini transfektsiyalashgan, oldin esa HEP G2 hujayralarining to'liq o'lchamli insulin cDNKsi bilan almashtirishgan.

Olingan HEP ​​G2 Insgl klonlarida glyukoza normal insulin sekretsiyasini rag'batlantiradi va sekretsiya ta'sirini boshqa sekretsiyalarga faollashtiradi.

Immunoelektron mikroskopi ostida Langerhans orollaridagi b-hujayralardagi morfologik jihatdan granulalarga o'xshash hujayralarda insulin o'z ichiga olgan granulalar topildi. 1-toifa diabetni davolashda genetik muhandislik usullari bilan olingan "sun'iy b-hujayradan" foydalanish imkoniyati jiddiy muhokama qilinmoqda.

Amaliy muammolarni hal qilish bilan bir qatorda, insulinning ta'sir etish mexanizmlari, shuningdek molekuladagi tarkibiy va funktsional munosabatlar o'rganiladi. Tadqiqot usullaridan biri insulin turli xil lotinlarini yaratish va ularning fizik-kimyoviy va immunologik xususiyatlarini o'rganish 23, 24 hisoblanadi.

Yuqorida aytib o'tilganidek, insulin ishlab chiqarishning bir qator usullari ushbu gormonni prekursor (proinsulin) shaklida ishlab chiqarishga asoslangan bo'lib, undan keyin insulin va C-peptidga enzimatik ajratish kiradi. Hozirgi vaqtda S-peptid uchun biologik faollikning mavjudligi ko'rsatilib, bu uni insulin bilan birga terapevtik maqsadlarda ishlatishga imkon beradi.

Ushbu seriyaning keyingi maqolalarida C-peptidning fizik-kimyoviy va biologik xususiyatlari, shuningdek uni tayyorlash usullari ko'rib chiqiladi.

Dori vositalarini ishlab chiqarishda biotexnologiya

STGh 20K versiyasini olish uchun ishlanmalar qiziqish uyg'otadi. Gormonning uzoq davom etadigan ta'sirini olish uchun nafaqat STHning turli shakllarini, balki immobilizatsiya qilingan STHni ham o'rganish istiqbolli vazifadir. Uzoq muddatli harakatga ega bo'lgan immigratsiyalangan STHchni olish uchun original usul ishlab chiqilgan.

STH ishlab chiqarish bilan bir qatorda, barcha turlarga xos bo'lganlarni va GST tomonidan ba'zi modifikatsiyani o'z ichiga olgan adenohipofiz gormonlarini ishlab chiqarish uchun o'ziga xos integratsiyalashgan texnologiya yaratildi. Genetik muhandislik tomonidan olingan STH (somatogen) terapevtik preparatini yaratish bo'yicha maqsadli dasturni amalga oshirish katta ahamiyatga ega.

Klinik tajriba shuni ko'rsatadiki, bo'yning o'sishini davolashni optimallashtirish natijasida, arsenalda turli xil texnologiyalar yoki hatto usullar (MF, Ausomatin, Somatogen) bo'yicha olingan bir nechta shunga o'xshash farmatsevtik preparatlarga ega bo'lish tavsiya etiladi.

HSCH bitta preparati bilan uzoq muddatli davolanish (yillar davomida) organizmdagi sezgirlikning pasayishiga olib keladi.

Qisman, bu antikorlarning shakllanishining natijasi bo'lishi mumkin, ammo asosiy sababni retseptorlari va gormonni qayta ishlash darajasida izlash kerak.

GST bilan ishlash, shuningdek, ajralib chiqadigan gormonlar va ularning turli shakllarini har tomonlama o'rganish tabiat tomonidan yaratilgan tizimlarni o'rganish va ularni yaxshiroq tushunish imkonini beradi. Organizmda STH-ning turli xil mahalliy shakllari mavjudligi ularning maqsadga muvofiqligini va masalan, klinikada foydalanish mumkinligini ko'rsatadi.

STHch yangi preparatlarini yaratishda, birinchi navbatda, STHch monomerida bo'lgani kabi, gormonning tabiiy tabiiy shakllariga e'tibor qaratish va agar kerak bo'lsa, ularni gen muhandisligi bo'yicha miqyoslash kerak.

GST dan STHch preparatlarini ishlab chiqarishda adenohipofizning boshqa gormonlarini (LGH, FSHch, TTGch va boshqalar) ishlab chiqarish bo'yicha kompleks texnologiya muvaffaqiyatli amalga oshirilmoqda. Yangi ilg'or usullarni (yaqinlik xromatografiyasi va boshqalar) joriy etish orqali ishlab chiqarishni optimallashtirish kerak.

), integrallashgan texnologiyadan foydalangan holda juda toza gormonlar olish.

Diagnostika va biotexnologiya uchun adenohipofiz gormonlarining immunomikanalizi to'plamlarini ishlab chiqarish va ulardan foydalanishni kengaytirish, turli xil o'lchovdagi standartlashtirilgan antikorlarni ishlab chiqarishni amalga oshirish, yangi STHch preparatlarini, shu jumladan immobilizatsiya qilinganlarni yaratish kerak.

STH oqsil, yog 'va mineral metabolizmiga ta'sir qilishi, maqsadli organisiz hujayra darajasida harakat qilishi va anabolik xususiyatga ega ekanligi uni qayta tiklash jarayonlarini rag'batlantirish va turli kasalliklarni davolash uchun ishlatishda katta imkoniyatlar yaratadi. Ushbu masalalarni kengroq o'rganish, shuningdek STGch-ning turli xil o'zgartirilgan shakllari va variantlaridan foydalanish imkoniyati dolzarb va istiqbolli vazifadir.

Biotexnologiyada insulin olish

Oshqozon osti bezi Langerhans orollaridagi peptid gormoni bo'lgan insulin diabetning asosiy davosi hisoblanadi. Ushbu kasallik insulin etishmovchiligidan kelib chiqadi va qon shakarining ko'payishi bilan namoyon bo'ladi. Yaqin vaqtgacha insulin buqa va cho'chqaning oshqozon osti bezidan olingan.

Preparat inson insulindan 1-3 aminokislotalarni almashtirish bilan ajralib turdi, shuning uchun allergik reaktsiyalar xavfi mavjud edi, ayniqsa bolalarda. Insulinni keng tarqalgan terapevtik iste'moli uning qimmatligi va cheklangan resurslari tufayli cheklandi.

Kimyoviy modifikatsiyada hayvonlarning insulinini odamdan ajratib bo'lmaydigan qildi, ammo bu mahsulot narxining qo'shimcha ko'tarilishini anglatadi.

1982 yildan beri EliLilly E. coli A va B zanjirlarining alohida sintezi asosida genetik jihatdan yaratilgan insulin ishlab chiqaradi. Mahsulot narxi sezilarli darajada pasaygan, natijada insulin inson uchun bir xil. 1980 yildan beri matbuotda proinsulin geni, cheklangan proteoliz bilan etuk shaklga aylanadigan gormon prekursorining klonlanishi haqida xabarlar paydo bo'ldi.

Enkapsülasyon texnologiyasi diabetni davolashda ham qo'llaniladi: bemorning tanasiga bir marta kiritilgan kapsuladagi pankreatik hujayralar yil davomida insulin ishlab chiqaradi.

Integrated Genetics follikulani ogohlantiruvchi va luteinizatsiya qiluvchi gormonlarni ishga tushirdi. Ushbu peptidlar ikkita pastki qismdan iborat. Kun tartibida asab tizimining oligopeptid gormonlari - 5 aminokislotalar qoldiqlaridan yasalgan ensefalinlar va morfin analoglari endorfinlarining sanoat sintezi ko'rib chiqiladi.

Bu peptidlar oqilona foydalanilganda og'riqni engillashtiradi, yaxshi kayfiyatni yaratadi, samaradorlikni oshiradi, diqqatni kuchaytiradi, xotirani yaxshilaydi va uyqu va uyg'onishni tartibga soladi.

Genetik muhandislik usullarini muvaffaqiyatli qo'llashning misoli peptid gormoni somatostatin uchun yuqorida tavsiflangan gibrid protein texnologiyasidan foydalanib p-endorfinning sintezi hisoblanadi.

Inson insulinini ishlab chiqarish usullari:

Tarixan, terapevtik maqsadlar uchun insulin olishning birinchi usuli bu gormonning analoglarini tabiiy manbalardan (qoramol va cho'chqalarning oshqozon osti bezi orollari) ajratishdir.

O'tgan asrning 20-yillarida mol va cho'chqa go'shti insulinlari (tarkibida insulin insulin tarkibiga va aminokislotalar qatoriga eng yaqin bo'lgan) inson tanasida inson insuliniga taqqoslanadigan faoliyatni ko'rsatishi aniqlandi. Shundan so'ng, buqa yoki cho'chqa insulin I turdagi diabet bilan og'rigan bemorlarni davolashda ishlatilgan.

Ammo, bir muncha vaqt o'tgach, ba'zi holatlarda mol va cho'chqa insulinlariga qarshi antikorlarning inson tanasida to'planib, shu bilan ularning ta'sirini rad etishi aniqlandi.

Boshqa tomondan, insulin olishning ushbu usulining afzalliklaridan biri bu insulin ishlab chiqarishning birinchi usulini ishlab chiqishda hal qiluvchi rol o'ynagan xom ashyo (mol go'shti va cho'chqa go'shti insulinini ko'p miqdorda olish mumkin).Ushbu usul yarim sintetik deb ataladi.

Inson insulinini ishlab chiqarishning ushbu usulida cho'chqa insulin ozuqa sifatida ishlatilgan. B zanjirining C-terminali oktapeptidi tozalangan chinni insulindan ajralib chiqdi, shundan so'ng inson insulinining C-terminali oktapeptidi sintez qilindi.

Keyin u kimyoviy biriktirildi, himoya guruhlari olib tashlandi va natijada olingan insulin tozalangan. Insulinni olishning ushbu usulini sinab ko'rishda, inson insuliniga erishilgan gormonning to'liq kimligi ko'rsatildi.

Ushbu usulning asosiy kamchiliklari natijasida hosil bo'lgan insulinning yuqori narxi (hattoki hozirda oktapeptidning kimyoviy sintezi, ayniqsa sanoat miqyosida qimmat bahodir).

Hozirgi vaqtda insulin asosan ikkita usulda olinadi: sintetik-enzimatik usul va gen muhandislik usuli bilan insulin insulinini modifikatsiya qilish orqali.

Birinchi holda, usul Ala30Thr B zanjirining C-terminalida bitta almashtirishda cho'chqa insulinining inson insulinidan farq qilishiga asoslanadi.

Alaninni treonin bilan almashtirish alaninni ferment-katalizatsiyalangan parchalanishi va uning o'rniga karboksidlar guruhi tomonidan himoyalangan tronin qoldig'ini qo'shish orqali amalga oshiriladi, bu reaktsiya aralashmasida katta miqdorda bo'ladi. Himoya O-tert-butil guruhini ajratgandan so'ng, insulin olinadi.

Insulin rekombinant DNK texnologiyasidan foydalangan holda tijorat maqsadlarida olingan birinchi protein edi. Insonning genetik jihatdan ishlab chiqilgan insulinini ishlab chiqarish uchun ikkita asosiy yondashuv mavjud.

Birinchi holda, ikkala zanjir uchun alohida (turli xil ishlab chiqaruvchi shtammlar) olinadi, undan keyin molekulaning katlanishi (disulfid ko'priklarining shakllanishi) va izoformlarning ajralishi kuzatiladi.

Ikkinchidan, gormonning faol shakliga tripsin va karboksipeptidaz B bilan fermentativ hazm qilishdan keyin prekursor (proinsulin) shaklida ishlab chiqarish.

Hozirgi vaqtda insulinni disulfid ko'priklarining to'g'ri yopilishini ta'minlaydigan prekursor shaklida olish afzalroqdir (zanjirlarni alohida tayyorlash, denatürasyonun ketma-ket aylanishi, izoformlarni ajratish va renatürasyon amalga oshiriladi).

Ikkala yondashuv bilan ham boshlang'ich tarkibiy qismlarni (A- va B-zanjirlari yoki proinsulinlari) va gibrid oqsillarning bir qismi sifatida olish mumkin. A va B zanjirlari yoki proinsulinga qo'shimcha ravishda gibrid oqsillar quyidagilarni o'z ichiga olishi mumkin:

1) tashuvchi oqsil - gibrid oqsilni hujayraning yoki madaniyat muhitining periplazmatik bo'shlig'iga tashilishini ta'minlaydi;

2) yaqinlik komponenti - gibrid oqsilning ajralishini sezilarli darajada osonlashtiradi.

Bunday holda, ikkala komponent bir vaqtning o'zida gibrid oqsil tarkibida bo'lishi mumkin. Bundan tashqari, gibrid oqsillarni yaratishda ko'p o'lchovlilik printsipidan foydalanish mumkin (ya'ni maqsadli polipeptidning bir nechta nusxasi gibrid oqsilda mavjud), bu maqsad qilingan mahsulotning hosildorligini sezilarli darajada oshirishi mumkin.

E. koli hujayralarida proinsulinni ifodalanishi ..

Bu ishda chiziqli proinsulin va Staphylococcus aureus oqsilidan iborat nukleotid ketma-ketligini o'z ichiga olgan nukleotid ketma-ketligi bilan metionin qoldig'i orqali N-terminaliga biriktirilgan parcha ishlatilgan.

Rekombinatsiya qilingan shtamm hujayralarining to'yingan biomassasini o'stirish gibrid oqsilni ishlab chiqarishni boshlaydi, uning izolyatsiyasi va ketma-ket o'zgarishi trubadagi insulinga olib keladi.

Boshqa tadqiqotchilar guruhi metinsin qoldig'i orqali inson proinsulinidan va polihistidin dumidan iborat sintezning bakterial ekspress tizimida rekombinant oqsilni olishdi. Ni-agaroza ustunlaridagi xelomatik xromatografiya yordamida qo'shma jismlardan ajratib olingan va siyanogen bromid bilan hazm qilingan.

Anion almashinadigan qatronlar va RP (teskari fazali) HPLC (ion almashtirish xromatografiyasi) orqali ion almashinadigan xromatografiya yordamida tozalangan proinsulinni xaritalash va massali spektrometrik tahlil qilish, mahalliy inson proinsulinining disulfid ko'priklariga mos keladigan disulfid ko'priklari mavjudligini ko'rsatdi. Shuningdek, prokaryotik hujayralarda genetik muhandislik tomonidan inson insulinini ishlab chiqarishning yangi, takomillashtirilgan usulini ishlab chiqish haqida xabar berilgan. Yozuvchilar paydo bo'lgan insulinni uning tuzilishi va biologik faolligi oshqozon osti bezidan ajratilgan gormon bilan bir xil ekanligini aniqladilar.

Yaqinda genetik muhandislik tomonidan rekombinant insulin ishlab chiqarish tartibini soddalashtirishga katta e'tibor qaratildi. Shunday qilib, lizin qoldig'i orqali proinsulin N-terminaliga biriktirilgan interleykinning etakchi peptididan iborat termoyadroviy oqsil olingan. Protein samarali ifoda etilgan va inklyuziya organlarida lokalizatsiya qilingan.

Izolyatsiyadan keyin protein insulin va C-peptid hosil qilish uchun tripsin bilan hazm qilindi. Boshqa tadqiqotchilar guruhi xuddi shunday harakat qilishdi. Proinsulin va stafilokokkning ikkita sintetik maydonidan tashkil topgan termoyadroviy protein IgG ni bog'laydigan tanalarga joylashtirilgan, ammo yuqori darajada ifoda etilgan.

Oqsil IgG yaqinlik xromatografiyasi bilan ajratilib, tripsin va karboksipeptidaz B bilan hazm qilingan. Natijada hosil bo'lgan insulin va C-peptid RP HPLC tomonidan tozalangan. Eritilgan konstruktsiyalarni yaratishda tashuvchi oqsil va maqsadli polipeptidning massa nisbati juda katta.

Termoyadroviy konstruktsiyalari, inson zardobidagi albumin bilan bog'laydigan oqsil tashuvchisi polipeptid sifatida ishlatiladigan joyda tasvirlanadi. Unga bitta, uch va ettita S-peptidlar biriktirilgan edi.

S-peptidlar Sfi I cheklov uchastkasini olib boradigan aminokislotali kosmik biriktirgichlar va spacerning boshida va oxirida tripsin bilan oqsilni keyinchalik parchalash uchun ikkita arginin qoldig'idan foydalanib, dum asosiga ulangan. Bo'linish mahsulotlarining HPLC C-peptidning ajralishi miqdoriy ekanligini ko'rsatdi va bu sanoat miqyosida maqsadli polipeptidlarni olish uchun multimerik sintetik genlardan foydalanishga imkon beradi.

Arg32Tyr o'rnini bosuvchi mutant proinsulin olish. Ushbu oqsil tripsin va karboksipeptidaz B bilan birlashtirilganida, mahalliy insulin va tirozin qoldig'ini o'z ichiga olgan C-peptid hosil bo'lgan. Ikkinchisi, 125I etiketlanganidan so'ng, radioimmunoassayda faol foydalaniladi.

Dori-darmonlarni ishlab chiqarish uchun mo'ljallangan insulin yuqori darajada toza bo'lishi kerak. Shuning uchun ishlab chiqarishning har bir bosqichida olingan mahsulotlarning tozaligini yuqori samarali nazorat qilish zarur. Ilgari, RP va IO (ion almashinuvi) HPLC, proinsulin-S-sulfonat, proinsulin, A- va B-zanjirlarni va ularning S-sulfonatlarini tavsiflash uchun ishlatilgan.

Shuningdek, flüoresan insulin lotiniga alohida e'tibor beriladi. Asarda mualliflar inson insulinini ishlab chiqarishning barcha bosqichlarida mahsulotlarni tahlil qilishda xromatografik usullarning qo'llanishi va informatsionligini o'rganib chiqdilar va natijada olingan mahsulotlarni samarali ajratish va tavsiflash uchun xromatografik operatsiyalar jadvalini tuzdilar.

Bundan tashqari, insulinning tozaligi va miqdorini aniqlash jarayonlarini avtomatlashtirish va tezlashtirish uchun yondashuvlar ishlab chiqilmoqda.

Insulinni aniqlash uchun elektrokimyoviy aniqlash bilan RP suyuq xromatografiyasidan foydalanish imkoniyatlari bo'yicha tadqiqotlar o'tkazildi va Langerhans orolidan ajratilgan insulinni immunoaffiniy xromatografiyasi yordamida spektrometrik aniqlash yordamida aniqlash metodologiyasi ishlab chiqilgan.

Ishda tezkor insulin mikrodeterminatsiyasini lazer floresansi yordamida kapillyar elektroforez yordamida qo'llash imkoniyati o'rganildi.Tahlil namunaga feniliziotsianat (FITC) bilan belgilangan ma'lum miqdordagi insulin va monoklonal insulin antikorlarining Fab qismini qo'shish orqali amalga oshiriladi. Yorliqli va muntazam insulinlar Fab kompleksi bilan raqobatdosh munosabatda bo'lishadi. FITZ bilan belgilangan insulin va uning Fab bilan biriktirilgan tarkibi 30 sekundda ajralib chiqadi.

Genetik muhandislik insulin

Insulin nima degan savol nafaqat shifokorlar va farmatsevtlar, balki qandli diabet bilan og'rigan bemorlarni, shuningdek ularning qarindoshlari va do'stlarini qiziqtiradi.

Bugungi kunda inson salomatligi uchun ushbu noyob va juda muhim gormonni maxsus ishlab chiqilgan va sinchkovlik bilan sinovdan o'tgan texnologiyalar yordamida turli xil xom ashyolardan olish mumkin. Tayyorlash usuliga qarab insulinning quyidagi turlari ajratiladi.

• Cho'chqa go'shti yoki mol go'shti, shuningdek hayvonot mahsuloti deb ataladi
• O'zgartirilgan biosintetik cho'chqa
• Genetik jihatdan yaratilgan yoki rekombinant
• Genetik jihatdan o'zgartirilgan
• Sintetik

Cho'chqa go'shti insulin diabet uchun eng uzoq vaqt ishlatilgan. Uni qo'llash o'tgan asrning 20-yillarida boshlangan.

Shuni ta'kidlash kerakki, cho'chqa go'shti yoki hayvon o'tgan asrning 80-yillariga qadar yagona dori edi. Uni olish uchun hayvonlarning oshqozon osti bezi to'qimalari qo'llaniladi.

Biroq, bu usulni maqbul yoki oddiy deb atash qiyin: biologik xom ashyo bilan ishlash har doim ham qulay emas va xom ashyoning o'zi etarli emas.

Bundan tashqari, cho'chqa insulinining tarkibi sog'lom odam tomonidan ishlab chiqarilgan gormon tarkibiga mutlaqo mos kelmaydi: ularning tarkibida turli xil aminokislotalar qoldiqlari mavjud. Shuni ta'kidlash kerakki, qoramol oshqozon osti bezi tomonidan ishlab chiqariladigan gormonlar bir-biridan ko'p farqlarga ega, bu ularni ijobiy hodisa deb atash mumkin emas.

Bunday tayyorgarlikda sof ko'p komponentli moddadan tashqari, zamonaviy tozalash usullari yordamida ajratib bo'lmaydigan proinsulin deb ataladigan modda ham mavjud. Aynan ko'pincha allergik reaktsiyalar manbai bo'lib qoladi, bu ayniqsa bolalar va qariyalar uchun xavflidir.

Dorixonalar yana bir bor diabetga chalinganlarga pul to'lamoqchi. Aqlli zamonaviy Evropa dori mavjud, ammo ular bu haqda jim turishadi. Bu.

Shu sababli, dunyo olimlari uzoq vaqtdan beri hayvonlar tomonidan ishlab chiqarilgan gormon tarkibini sog'lom odamning oshqozon osti bezi gormonlariga to'liq moslashtirishdan manfaatdor. Qandli diabetning farmakologiyasi va davolashida chinakam yutuq bu hayvonlarning aminokislotali alaninini treonin bilan almashtirish natijasida olingan yarim sintetik dori ishlab chiqarish edi.

Shu bilan birga, gormonni ishlab chiqarishning yarim sintetik usuli hayvonlar uchun mo'ljallangan preparatlardan foydalanishga asoslangan. Boshqacha qilib aytganda, ular shunchaki modifikatsiyadan o'tadilar va odamlar ishlab chiqaradigan gormonlar bilan bir xil bo'ladilar. Ularning afzalliklari orasida inson tanasiga mosligi va allergik reaktsiyalar yo'qligi.

Ushbu usulning kamchiliklari orasida xom ashyoning etishmasligi va biologik materiallar bilan ishlash qiyinligi, shuningdek, texnologiyaning o'zi ham, natijada olingan dori-darmon ham yuqori narxga ega.

Shu munosabat bilan diabetni davolash uchun eng yaxshi dori bu genetik muhandislik tomonidan olingan rekombinant insulindir.

Aytgancha, uni ko'pincha genetik jihatdan ishlab chiqilgan insulin deb atashadi, shuning uchun uni olish usulini ko'rsatadi va natijada olingan mahsulot inson insulin deb ataladi, shu bilan uning sog'lom odamning oshqozon osti bezi tomonidan ishlab chiqariladigan gormonlar bilan mutlaq o'ziga xosligini ta'kidlaydi.

Genetik muhandislik insulinining afzalliklari orasida uning yuqori darajada tozaligi va proinsulin etishmasligi, shuningdek, u allergik reaktsiyalarga olib kelmasligi va kontrendikatsiyalari yo'qligi ham e'tiborga olinishi kerak.

Tez-tez so'raladigan savol tushunarli: rekombinant insulin aynan nimadan iborat? Ma'lum bo'lishicha, bu gormon xamirturush shtammlari, shuningdek, maxsus ozuqaviy muhitga joylashtirilgan Escherichia coli tomonidan ishlab chiqariladi. Bundan tashqari, olingan modda miqdori shunchalik kattaki, hayvonlarning organlaridan olingan dorilarni iste'mol qilishdan butunlay voz kechish mumkin.

Albatta, bu oddiy E. coli haqida emas, balki geni o'zgartirilgan va tuzilishi va xossalari sog'lom odamning oshqozon osti bezi hujayralari tomonidan ishlab chiqariladigan gormon bilan bir xil bo'lgan, insonning genetik jihatdan muhandis bo'lgan insulinini ishlab chiqarishga qodir.

Genetik muhandislik insulinining afzalliklari uning inson gormoniga mutlaq o'xshashligi bilan bir qatorda, tayyorlashning qulayligi, etarli miqdordagi xom ashyo va arzon narxdir.

Dunyo olimlari rekombinant insulin ishlab chiqarishni diabetni davolashda haqiqiy yutuq deb bilishadi. Ushbu kashfiyotning ahamiyati shunchalik katta va muhimki, uni haddan tashqari baholash qiyin.

Shunisi e'tiborga loyiqki, bugungi kunda ushbu gormonga bo'lgan ehtiyojning deyarli 95 foizi genetik jihatdan yaratilgan insulin yordamida qondiriladi.

Shu bilan birga, ilgari dorilarga alerjisi bo'lgan minglab odamlar normal hayot uchun imkoniyatga ega bo'lishdi.

Menda 31 yil davomida diabet bor edi. Hozir u sog‘-salomat. Ammo, bu kapsulalar oddiy odamlar uchun mavjud emas, ular dorixonalarni sotishni xohlamaydilar, bu ular uchun foydali emas.

Inson muhandisligi insulin qanday ishlaydi

1-toifa diabetni davolashda ikki fazali inson genetik muhandislik insulin ishlatiladi. Dorixonalarda u eritma shaklida sotiladi va "Sevimli" belgisiga ega. Ikkinchi turdagi kasallik, shuningdek, agar belgilangan dorilar diabetga chalingan odam uchun mos bo'lmasa, bunday dori bilan davolanishi mumkin.

Agar odamda diabetik koma bo'lsa, genetik jihatdan yaratilgan insulin ham qo'llaniladi. Shifokorlar ko'pincha shakarni kamaytiradigan tabletkalar va terapevtik parhez yordam bermasa, diabetga chalingan homilador ayollarga in'ektsiyalarni buyuradilar.

Umuman olganda, genetik jihatdan ishlab chiqilgan insulinlar yoki GMO tug'ruq paytida, jarrohlik paytida yoki diabet kasalligi jiddiy shikastlanganda qo'llaniladi. Preparat sizga tez ta'sir etadigan gormonlardan foydalanishga ishonch bilan o'tishga imkon beradi.

1. Insulin bifazik odamning genetik muhandisligini ishlatishdan oldin, test o'tkazish va ushbu dori bemorga mos kelishini aniqlash kerak. Agar diabet kasalligi gipoglikemiyani aniqlasa, preparatni qo'llash tavsiya etilmaydi.
2. Eritmaning ta'sir qilish sxemasi shundaki, genetik jihatdan ishlab chiqilgan insulin hujayralar bilan o'zaro ta'sir qiladi, bu esa komplekslarning shakllanishiga olib keladi. Hujayralar ushbu komplekslarga kirganda, ular rag'batlantiriladi va faolroq ishlay boshlaydi. Natijada ko'proq fermentlar ishlab chiqariladi.
3. Jarayonda glyukoza tezroq so'riladi, organizmga kiradigan uglevodlar faol ravishda qayta ishlanadi. Shunday qilib, jigar glyukozani uzoqroq ishlab chiqaradi va oqsillar tezroq so'rilishi mumkin.

Preparatning ta'sir qilish printsipi dozaga, insulin turiga, in'ektsiya joyini tanlashga bog'liq. Har qanday protsedura faqat tashrif buyuradigan shifokor bilan kelishilganidan keyin amalga oshirilishi kerak. Birinchi in'ektsiyalar tibbiy nazorat ostida amalga oshiriladi.

Preparatni qo'llash bo'yicha tavsiyalar

Shunga o'xshash yoki insulin bifazik inson genetik muhandisligi turli xil savdo nomlariga ega. Shuningdek, gormonlar ta'sir qilish muddati, eritmani tayyorlash usuli bilan farq qilishi mumkin. Mahsulotlar insulin turiga qarab nomlanadi.

Genetik jihatdan ishlab chiqilgan insulinlar Humudar, Vozulim, Actrapid kabi dorilarga kiradi. Insuran, Gensulin. Bu bunday dorilarning to'liq ro'yxati emas, ularning soni juda katta.

Yuqoridagi barcha dorilar organizmga ta'sir qilish nuqtai nazaridan farq qiladi.GMO bir necha soat davom etishi yoki butun kun davomida faol bo'lishi mumkin.

Ikki fazali kombinatsiyalangan dorilar tarkibiga ta'sir qilish davrini o'zgartiradigan ba'zi tarkibiy qismlarni o'z ichiga olgan dorilar kiradi.

• Bunday dorilar aralashmalar shaklida, shu jumladan genetik ravishda olingan gormonlar shaklida sotiladi.
• Ushbu mablag'larga Mikstard, Insuman, Gansulin, Gensulin kiradi.
• Giyohvand moddalar kuniga ikki marta, ovqatdan yarim soat oldin ishlatiladi. Bunday tizimga qat'iy rioya qilish kerak, chunki gormon ovqatlanish davriga bevosita bog'liq.

Inson insulinini gen ishlab chiqarishda o'rtacha ta'sir qilish vaqtiga ega bo'lgan preparat olinadi.

1. Eritma 60 daqiqa ichida kuchga kiradi, ammo eng yuqori faollik momenti inyeksiyadan olti-etti soat o'tgach kuzatiladi.
2. Dori 12 soatdan keyin tanadan butunlay chiqariladi.
3. Bunday dorilarga Insuran, Insuman, Protafan, Rinsulin, Biosulin kiradi.

Shuningdek, organizmga qisqa muddat ta'sir qiladigan GMO mavjud. Ular orasida Insulin Actrapid, Gansulin, Humulin, Insuran, Rinsulin, Bioinsulin dorilari mavjud. Bunday insulinlar ikki-uch soatdan keyin faol fazaga ega va preparatning ta'sirlanishining dastlabki belgilari in'ektsiyadan keyin yarim soat ichida namoyon bo'ladi.

Insulin yuborilishidan oldin, GMOlarning shaffofligi va suyuqlikda begona moddalar yo'qligi tekshirilishi kerak. Agar tibbiyotda begona moddalar aniqlansa, xiralashish yoki yog'ingarchilik bo'lsa, flakon tashlanishi kerak - dori foydalanish uchun mos emas.

Amaldagi insulin xona haroratida bo'lishi kerak. Agar diabetga chalingan odamda yuqumli kasallik, qalqonsimon disfunktsiya, Addison kasalligi, gipopituitarizm va surunkali buyrak kasalligi bo'lsa, gormonning dozasini o'zgartirish kerak.

Gipoglikemiya xurujlari preparatning haddan tashqari dozasida, insulinning yangi turiga o'tish holatida, ovqatni tashlab ketish yoki jismoniy zo'riqish tufayli kelib chiqishi mumkin. Buning sababi gormonga bo'lgan ehtiyojni kamaytiradigan kasalliklar bo'lishi mumkin - buyrak kasalligi, jigar kasalligi, qalqonsimon bez, buyrak usti bezlari korteksi va gipofiz.

1. Qon shakarining keskin pasayishi in'ektsiya maydonining o'zgarishi bilan mumkin. Shuning uchun, bitta insulin turidan oqilona va faqat davolovchi shifokor bilan kelishgandan so'ng o'tish kerak.
2. Agar diabetga chalingan odam qisqa muddatli insulin iste'mol qilsa, ba'zida inyeksiya joyida yog 'to'qimalarining hajmi kamayadi yoki aksincha ortadi. Buning oldini olish uchun in'ektsiya turli joylarda amalga oshirilishi kerak.

Homilador ayollar, homiladorlikning turli trimestrlarida insulinga talablar o'zgarishi mumkinligini bilishlari kerak. Buning uchun har kuni glyukometr yordamida qon shakarini tekshirish kerak.

Insulinning inson tanasiga ta'siri ushbu maqoladagi videoda batafsil tasvirlangan.

1. Insulinning tuzilishi va vazifalari 5

1.1. 5-insulin molekulasining tuzilishi

1.2. 7. Insulinning biologik ahamiyati

1.3. Insulin biosintezi 8

2. Genetik muhandislik insulin sintezi 10

2.1. Dori vositalarini sintez qilishda genetik muhandislik usullaridan foydalanish 10

2.2. Genetika muhandislik usullari 11

2.3. Genetik muhandislik insulin ishlab chiqarish 14

Xulosa 18

Dozani oshirib yuborish belgilari

Insulinni ishlatganda, shifokorning tavsiyalariga amal qilish va belgilangan dorining aniq dozasini kuzatish muhimdir.

Qoidalarga rioya qilmasa va dozani oshirib yuboradigan bo'lsa, diabetga chalingan odam qattiq bosh og'rig'i, kramplar, ochlik, terlash, yurak urishi bilan og'riy boshlaydi, odam haddan tashqari ishlamaydi, jahli chiqadi. Butun tanadagi titroq va titroq ham kuzatilishi mumkin.

Bunday alomatlar qon shakarining pasayishi belgilariga juda o'xshash.Semptomlarning engil bosqichi bilan diabet kasalligi mustaqil ravishda muammoni hal qilishi va ahvolini yaxshilashi mumkin. Buning uchun shakarni yoki shakar tarkibidagi boshqa shirin mahsulotni iste'mol qiling.

• Agar diabetik koma paydo bo'lsa, ular dekstroz eritmasidan foydalanadilar, preparat odam ongiga kelguncha tomir ichiga yuboriladi. Birinchi shubhali belgilarda tez yordamni chaqirish kerak, bu favqulodda usullar bilan bemorni hayotga qaytarishga qodir.
• GMO dan keyin yon ta'sir sifatida, odamda ürtiker shaklida terida toshmalar paydo bo'ladi, tananing qismlari shishadi, qon bosimi keskin pasayadi, qichishish va nafas qisilishi paydo bo'lishi mumkin. Bu bir muncha vaqt o'tgach, tibbiy aralashuvisiz o'z-o'zidan yo'q bo'lib ketishi mumkin bo'lgan dori uchun allergik reaktsiya. Agar vaziyat davom etsa, shifokoringizga murojaat qilishingiz kerak.
• Insulin preparatini qabul qilgan dastlabki kunlarda diabet kasalligi ko'pincha tanani suvsizlantiradi, odam suyuqlik etishmovchiligini boshdan kechiradi, tuyadi yomonlashadi, qo'l va oyoqlarda shish paydo bo'ladi, doimiy uyquchanlik seziladi. Bunday alomatlar odatda tez o'tib ketadi va qaytalanmaydi.

Sharhlar va sharhlar

Menda 2-toifa diabet bor - insulinga bog'liq emas. Do'stingiz DiabeNot bilan qon shakarini tushirishni maslahat berdi. Internet orqali buyurtma berdim. Qabul boshlandi.

Men qat'iy dietaga rioya qilaman, har kuni ertalab 2-3 kilometr piyoda yura boshladim. So'nggi ikki hafta ichida men nonushta qilishdan oldin ertalab soat 9.3 dan 7.1 gacha va hatto kecha 6gacha shakarning pasayishini sezaman.

1! Men profilaktika kursini davom ettiraman. Muvaffaqiyatlar haqida obunani bekor qilaman.

Margarita Pavlovna, men hozir Diabenotda o'tiraman. SD 2. Men, albatta, dietaga va yurishga vaqtim yo'q, lekin men shirinliklar va uglevodlarni suiiste'mol qilmayman, menimcha, XE, lekin yoshga qarab shakar hali ham yuqori.

Natijalar siznikidek yaxshi emas, lekin 7.0 shakar uchun bir hafta davomida chiqmaydi. Siz shakarni qaysi glyukometr bilan o'lchaysiz? U sizga plazma yoki butun qonni ko'rsatadimi? Men dorilarni qabul qilishdan olingan natijalarni taqqoslamoqchiman.

Bunday ma'lumotli postingiz uchun katta rahmat.

Genetik muhandislik insulin ishlab chiqarish

Biror kishini sog'lom his qilish uchun tanadagi insulin darajasini kuzatib borishingiz kerak. Bu gormon etarli bo'lishi kerak, shunda qondagi glyukoza to'planmaydi. Aks holda, metabolik kasalliklar bo'lsa, shifokor diabetga tashxis qo'yadi.

Qandli diabetning oldingi bosqichi uchun terapiya tanadan tabiiy ravishda ishlab chiqarilmaydigan insulin konsentratsiyasini to'ldirishdan iborat. Buning uchun inson tomonidan genetik jihatdan ishlab chiqilgan o'xshash eriydigan insulin ishlatiladi. Oshqozon osti bezi bunday gormonni ishlab chiqarish uchun javobgardir.

Insulin ishlab chiqarish uchun nafaqat tabiiy gormon ishlab chiqarish texnologiyasidan foydalaniladi, ishlab chiqaruvchilar sun'iy ravishda olingan o'zgartirilgan insulinni ham ishlatadilar. "Solubilis" deb belgilangan preparat eriydi deb ko'rsatilgan.

Dori turlari

Shunga o'xshash yoki insulin bifazik inson genetik muhandisligi turli xil savdo nomlariga ega. Shuningdek, gormonlar ta'sir qilish muddati, eritmani tayyorlash usuli bilan farq qilishi mumkin. Mahsulotlar insulin turiga qarab nomlanadi.

Genetik jihatdan ishlab chiqilgan insulinlar Humudar, Vozulim, Actrapid kabi dorilarga kiradi. Insuran, Gensulin. Bu bunday dorilarning to'liq ro'yxati emas, ularning soni juda katta.

Yuqoridagi barcha dorilar organizmga ta'sir qilish nuqtai nazaridan farq qiladi. GMO bir necha soat davom etishi yoki butun kun davomida faol bo'lishi mumkin.

Ikki fazali kombinatsiyalangan dorilar tarkibiga ta'sir qilish davrini o'zgartiradigan ba'zi tarkibiy qismlarni o'z ichiga olgan dorilar kiradi.

• Bunday dorilar aralashmalar shaklida, shu jumladan genetik ravishda olingan gormonlar shaklida sotiladi.
• Ushbu mablag'larga Mikstard, Insuman, Gansulin, Gensulin kiradi.
• Giyohvand moddalar kuniga ikki marta, ovqatdan yarim soat oldin ishlatiladi. Bunday tizimga qat'iy rioya qilish kerak, chunki gormon ovqatlanish davriga bevosita bog'liq.

Inson insulinini gen ishlab chiqarishda o'rtacha ta'sir qilish vaqtiga ega bo'lgan preparat olinadi.

1. Eritma 60 daqiqa ichida kuchga kiradi, ammo eng yuqori faollik momenti inyeksiyadan olti-etti soat o'tgach kuzatiladi.
2. Dori 12 soatdan keyin tanadan butunlay chiqariladi.
3. Bunday dorilarga Insuran, Insuman, Protafan, Rinsulin, Biosulin kiradi.

Shuningdek, organizmga qisqa muddat ta'sir qiladigan GMO mavjud. Ular orasida Insulin Actrapid, Gansulin, Humulin, Insuran, Rinsulin, Bioinsulin dorilari mavjud. Bunday insulinlar ikki-uch soatdan keyin faol fazaga ega va preparatning ta'sirlanishining dastlabki belgilari in'ektsiyadan keyin yarim soat ichida namoyon bo'ladi.

Bunday dorilar olti soatdan keyin butunlay chiqariladi.

Qandli diabet uchun genetik jihatdan ishlab chiqilgan insulin eritmasidan foydalanish

Inson tomonidan genetik jihatdan yaratilgan insulin - bu oshqozon osti bezi ishlab chiqaradigan insulin uchun keng tarqalgan gormon.

Sintez qilish uchun nafaqat genetik jihatdan o'zgartirilgan inson gormoni, balki sintetik ravishda yaratilgan modda ham qo'llaniladi. Preparatni yaratishning yana bir taniqli varianti modifikatsiyalangan cho'chqa insulinidan foydalanish hisoblanadi, chunki

tarkibi va funktsiyalarida u insonga eng yaqin.

Genetik muhandislik insulinini ishlab chiqarish jadvali.

Ko'rsatmalar va kontrendikatsiyalar

Genetik jihatdan ishlab chiqilgan insulinni gipoglikemik xususiyatga ega og'iz dori-darmonlariga barqaror reaktsiya kuzatilganda, 1-toifa diabet va 2-toifa diabet uchun ham foydalanish mumkin.

Bemor ma'lum bir komada bo'lganida foydalanish mumkin. Agar homilador ayol diabetni boshlayotgan bo'lsa, unda muhandislik insulinidan foydalanishga ruxsat beriladi, ammo parhez glyukoza darajasiga ta'sir qilmasagina. Uning ishlatilishi gipertermiya kuzatilishi mumkin bo'lgan infektsiyalar bilan kasallangan hollarda tavsiya etiladi.

Gen preparatlari tug'ruq paytida, operatsiyalarda, jarohatlarda, metabolik kasalliklar paytida va uzoq vaqt davomida insulin asta-sekin o'tish holatida muvaffaqiyatli qo'llaniladi.

Gormonni preparatning ayrim elementlariga yuqori sezuvchanlik va gipoglikemiya o'rnini bosadigan gen preparatlarini qo'llash taqiqlanadi.

Dori vositalarining farmakologik ta'siri

Ushbu turdagi dorilar hujayra membranalarining ma'lum retseptorlari bilan reaksiyaga kirishib, ular bilan komplekslar hosil qiladi. U hujayralarga kirganda, preparat kompleksi bu ishga ta'sir qiladi, uni yanada faolroq bo'lishga va qo'shimcha fermentlar ishlab chiqarishga undaydi.

Glyukoza darajasi hujayralar tomonidan tezroq qayta ishlanganligi sababli tushadi. Shundan so'ng lipogenez, oqsil ishlab chiqarish jarayoni jadallashadi va jigarda glyukoza hosil bo'lish tezligi pasayadi.

Preparatning davomiyligi qabul qilish joyiga, dori turiga, dozasi va inson tanasining individual ta'siriga bog'liq bo'ladi. Ushbu guruhda faqat shifokor dozani tayinlashi va ba'zi dorilarni buyurishi mumkin. Dori-darmonlarni qabul qilishning dastlabki davrida bemorning dori-darmonlarni qabul qilmasliklarini bilish uchun shifokorlar tomonidan diqqat bilan kuzatib boriladi.

Genetik jihatdan muhandis bo'lgan insulin dori-darmonlariga misollar

Insonning genetik mexanizmi bilan yaratilgan insulin Insuran, Insuman, Vozulim, Penfill, Biosulin, Gensulin, Actrapid, Rinsulin, Humulin, Humudar, Rosinsulin va boshqa ko'plab taniqli dorilarda mavjud.

Turli xil insulin turlari mavjud.Tasniflardan biri preparatning davomiyligi bilan bog'liq. Uning so'zlariga ko'ra, eriydigan insulin qisqa va uzoq ta'sirga ega bo'lishi mumkin. Birlashtirilgan dorilar (bifazik insulin) mavjud bo'lib, ular tez va uzoq muddatli ta'sir qiluvchi moddalarni o'z ichiga oladi.

Ushbu turdagi dori aralashma deb ataladi. Ular orasida inson gormoni o'zgarishi bilan yaratilganlar ham bor. Ikki fazali insulin - Mikstard, Gansulin, Insuman, Humulin va Gensulin. Ular kuniga ikki marta, ovqatdan yarim soat oldin foydalanishlari kerak.

Buning sababi, ikki fazali insulinning qisqa ta'sir qiluvchi moddaga ega ekanligi, uning qabul qilinishi dietaga bog'liq.

Inson gormonining muhandislik analogi o'rtacha davomiylik darajasiga ega dorilar qatoriga kiradi. Ushbu eriydigan insulin bir soatdan keyin harakat qila boshlaydi va uning faol cho'qqisi 7 soatdan keyin sodir bo'ladi. 12 soatdan keyin u ko'rsatiladi. Ushbu guruhning odam tomonidan ishlab chiqarilgan giyohvand moddalari Insuman, Protafan, Humulin, Rinsulin, Biosulin, Gensulin, Gansulin, Insuran.

Qisqa harakatga ega bo'lgan guruh orasida insonning genetik vositasi bilan yaratilgan dori mavjud. Masalan, ular orasida Gansulin, Insuran, Humulin, Rinsulin, Gensulin, Bioinsulin va Actrapid mavjud. Bunday eriydigan insulin yarim soat ichida harakat qila boshlaydi va uning faolligi bir necha soat ichida maksimal darajaga etadi. Bunday dorilar 6 soat davomida chiqariladi.

Dori vositalarining haddan tashqari dozasida glyukoza bilan ishlaydigan insulin bo'lsa, zaiflik, uyquchanlik, charchoq, asabiylashish, titroq, sovuq terning ajralib chiqishi, titroq, rangparlik, yurak urishi, bosh og'rig'i, kramplar va ochlik paydo bo'lishi mumkin. Bularning barchasi gipoglikemiya alomatlaridir.

Agar bu kasallik endigina rivojlana boshlagan bo'lsa va uning avvalroq, osonroq bosqichida bo'lsa, unda siz barcha simptomlarni o'zingiz yo'q qilishingiz mumkin. Buning uchun siz shakar va uglevodlarga boy ovqatni iste'mol qilishingiz kerak, bu oson hazm bo'lishi mumkin. Glyukagon va dekstroz eritmasi tanaga kiritilishi mumkin.

Agar biror kishi komaga tushib qolgan bo'lsa, unda vaziyat yaxshilanmaguncha modifikatsiyalangan dekstroz eritmasini yuborish kerak.

Ba'zi odamlar insulin bilan genetik modifikatsiyalangan dorilarni qo'llashda allergik reaktsiyalarni rivojlanishi mumkin. Alomatlar orasida ürtiker, shishish, kuch yo'qotish, past qon bosimi, nafas qisilishi, toshma, isitma va qichishish bo'lishi mumkin.

Ba'zi hollarda gipoglikemiya va koma paydo bo'ladi. Inson ongi bilan bog'liq muammolar va hatto koma paydo bo'lishi mumkin. Agar bemor dori-darmonlarni qabul qilmasa, u holda giperglikemiya rivojlanishi mumkin.

Bu tanadagi yuqumli hodisalar rivojlanishi bilan, shuningdek, parhez qoidalariga rioya qilmasangiz, dastlabki past dozalar tufayli paydo bo'ladi.

Ba'zi hollarda bemorda preparat qabul qilingan joylarda lipodistrofiya rivojlanishi mumkin.

Preparatni qo'llashning boshida shish, suv etishmasligi, uyquchanlik va ishtahani buzishi mumkin. Ammo bu hodisalar vaqtinchalik.

Tabiiy insulin o'rnini bosuvchi vositadan foydalanish, masalan, genetik jihatdan ishlab chiqilgan modda diabet kasalligini davolash uchun ajoyib qo'shimcha hisoblanadi.

Glyukoza hujayralar tomonidan ko'proq so'rilishi va uni tashish jarayonlari o'zgarishi tufayli shakar miqdorini pasaytirishga yordam beradi. Ammo bu dorilarni shifokorning ko'rsatmasi bo'yicha qat'iyan ishlatish kerak, chunki

ular bemor uchun istalmagan sog'liqqa olib kelishi mumkin.

Insulin nimadan iborat?

Insulin 1-toifa diabetni davolashda asosiy vositadir. Ba'zan bu kasallikning ikkinchi turida bemorning ahvolini barqarorlashtirish va uning farovonligini yaxshilash uchun ham ishlatiladi. Ushbu modda o'z xususiyatiga ko'ra kichik dozalarda uglevod almashinuviga ta'sir ko'rsatadigan gormondir.

Odatda, oshqozon osti bezi etarli miqdordagi insulin ishlab chiqaradi, bu qon shakarining fiziologik darajasini saqlab turishga yordam beradi. Ammo jiddiy endokrin kasalliklar bilan bemorga tez-tez yordam berishning yagona imkoniyati insulin in'ektsiyasidir.

Afsuski, uni og'iz orqali qabul qilish mumkin emas (planshetlar shaklida), chunki u ovqat hazm qilish tizimida butunlay yo'q bo'lib, biologik ahamiyatini yo'qotadi.

Hayvonlardan olinadigan preparatlar

Cho'chqalar va qoramollarning oshqozon osti bezidan ushbu gormonni olish bugungi kunda kam qo'llaniladigan eski texnologiya hisoblanadi.

Bu qabul qilingan dorilarning past sifati, allergik reaktsiyalarga moyilligi va etarli darajada tozalanmaganligi bilan bog'liq.

Gap shundaki, gormon oqsil moddasi bo'lganligi sababli, u aminokislotalarning ma'lum bir to'plamidan iborat.

Cho'chqa tanasida ishlab chiqarilgan insulin aminokislotalar tarkibida inson insulinidan 1 ta aminokislotaga va mol insulinidan 3 ga farq qiladi.

XX asrning boshlari va o'rtalarida, shunga o'xshash dorilar mavjud bo'lmagan paytda, hatto bunday insulin tibbiyotda katta yutuq bo'lib, diabetga chalinganlarni davolashni yangi bosqichga olib chiqishga imkon berdi. Ushbu usul bilan olingan gormonlar qon shakarini kamaytirdi, ammo ular ko'pincha yon ta'sirga va allergiyaga sabab bo'ldi.

Tibbiyotdagi aminokislotalar va aralashmalar tarkibidagi tafovutlar bemorlarning ahvoliga ta'sir qildi, ayniqsa bemorlarning zaifroq toifalariga (bolalar va qariyalar).

Bunday insulinning yomon tolerantligining yana bir sababi bu preparatda uning faol bo'lmagan prekursorining mavjudligi (proinsulin), chunki bu o'zgaruvchan dori vositasida bu o'zgarishlardan qutulish mumkin emas edi.

Hozirgi vaqtda ushbu kamchiliklardan mahrum bo'lgan rivojlangan cho'chqa go'shti insulinlari mavjud. Ular cho'chqaning oshqozon osti bezidan olinadi, ammo keyin qo'shimcha ishlov berilib, tozalanadi. Ular ko'p komponentli bo'lib, tarkibida qo'shimcha moddalar mavjud.

O'zgartirilgan cho'chqa go'shti insulinining inson gormonidan deyarli farqi yo'q, shuning uchun u amalda ham qo'llaniladi

Bunday dorilar bemorlar tomonidan yaxshi qabul qilinadi va amalda salbiy reaktsiyalarni keltirib chiqarmaydi, immunitet tizimini inhibe qilmaydi va qon shakarini kamaytiradi. Hozirgi kunda mol insulini tibbiyotda qo'llanilmaydi, chunki u tashqi tuzilishi tufayli inson immunitetiga va boshqa tizimlariga salbiy ta'sir ko'rsatmoqda.

Genetik muhandislik insulin

Sanoat miqyosida diabet kasalligi uchun ishlatiladigan insulin ikki xil usulda olinadi:

Insulinni saqlash shartlari

• qorin insulinini fermentativ davolashdan foydalanib,
• genetik modifikatsiyalangan Escherichia coli yoki xamirturush shtammlarini ishlatish.

Fizik-kimyoviy o'zgarish bilan, maxsus fermentlar ta'sirida porchin insulin molekulalari inson insuliniga o'xshash bo'lib qolmoqda. Olingan preparatning aminokislotalar tarkibi inson tanasida ishlab chiqarilgan tabiiy gormon tarkibidan farq qilmaydi.

Ishlab chiqarish jarayonida dori yuqori darajada tozalanadi, shuning uchun allergik reaktsiyalar va boshqa istalmagan namoyonlarni keltirib chiqarmaydi.

Ammo ko'pincha insulin modifikatsiyalangan (genetik jihatdan o'zgartirilgan) mikroorganizmlar yordamida olinadi. Biotexnologik usullardan foydalangan holda bakteriyalar yoki xamirturushlar o'zlari insulin ishlab chiqaradigan tarzda o'zgartiriladi.

Insulin ishlab chiqarilishidan tashqari, uning tozalanishi ham muhim rol o'ynaydi. Preparat allergik va yallig'lanish reaktsiyalariga olib kelmasligi uchun har bir bosqichda mikroorganizmlarning shtammlari va barcha eritmalar, shuningdek ishlatiladigan ingredientlarning tozaligini kuzatib borish kerak.

Bunday insulin ishlab chiqarishning 2 usuli mavjud. Ulardan birinchisi bitta mikroorganizmning ikki xil shtammini (turlarini) ishlatishga asoslangan.

Ularning har biri gormon DNK molekulasining bitta zanjirini sintez qiladi (ularning ikkitasi bor va ular spiral shaklida buralgan).

Keyin bu zanjirlar ulanadi va natijada eritmaning faol shakllarini hech qanday biologik ahamiyatga ega bo'lmaganlardan ajratish mumkin.

Escherichia coli yoki xamirturushdan foydalangan holda dori-darmonlarni qabul qilishning ikkinchi usuli, mikrob birinchi navbatda faol bo'lmagan insulinni (ya'ni uning oldingi egasi, proinsulin) ishlab chiqarilishiga asoslanadi. Keyin, enzimatik davolanish yordamida ushbu shakl faollashadi va tibbiyotda qo'llaniladi.

Muayyan ishlab chiqarish korxonalariga kirish huquqiga ega bo'lgan xodimlar har doim steril himoya kostyumi bilan kiyinishlari kerak, bu preparatning insonning biologik suyuqliklari bilan aloqasini yo'q qiladi.

Ushbu jarayonlarning barchasi odatda avtomatlashtirilgan, havo va ampulalar va flakonlar bilan aloqa qiladigan barcha yuzalar steril, asbob-uskuna liniyalari esa germetik ravishda yopilgan.

Biotexnologiya usullari olimlarga diabetga qarshi alternativ echimlar haqida o'ylashga imkon beradi.

Masalan, bugungi kunda genetik muhandislik usullari yordamida olinishi mumkin bo'lgan sun'iy pankreatik beta-hujayralarni ishlab chiqarish bo'yicha klinik tekshiruvlar olib borilmoqda.

Ehtimol, kelajakda ular kasal odamda ushbu organning faoliyatini yaxshilash uchun ishlatiladi.

Zamonaviy insulin preparatlarini ishlab chiqarish avtomatlashtirish va insonning minimal aralashuvini o'z ichiga olgan murakkab texnologik jarayondir

Qo'shimcha tarkibiy qismlar

Zamonaviy dunyoda insulinni qo'shimcha moddalarsiz ishlab chiqarishni tasavvur qilish deyarli mumkin emas, chunki ular uning kimyoviy xususiyatlarini yaxshilaydi, ta'sir qilish vaqtini uzaytiradi va yuqori darajada poklikka erishadi.

Ularning xususiyatlari bo'yicha barcha qo'shimcha ingredientlarni quyidagi sinflarga bo'lish mumkin.

• uzaytirgichlar (preparatning uzoqroq ta'sirini ta'minlash uchun ishlatiladigan moddalar),
• dezinfektsiyalash komponentlari
• stabilizatorlar, buning natijasida preparat eritmasida eng maqbul kislotalilik saqlanib qoladi.

Qo'shimchalarni uzaytirish

Biologik faolligi 8 dan 42 soatgacha davom etadigan uzoq vaqt davomida ishlaydigan insulinlar mavjud (preparat guruhiga qarab). Ushbu ta'sir maxsus moddalarni - in'ektsiya eritmasiga prolongatatorlarni qo'shish natijasida erishiladi. Buning uchun ko'pincha quyidagi birikmalardan biri ishlatiladi:

Preparatning ta'sirini uzaytiradigan oqsillar to'liq tozalanadi va kam allergen hisoblanadi (masalan, protamin). Sink tuzlari ham insulin faolligiga, ham inson farovonligiga salbiy ta'sir ko'rsatmaydi.

Insulin tarkibidagi dezinfektsiyalash vositalari mikrobial florani saqlash va undan foydalanish paytida ko'paymasligi uchun zarurdir. Ushbu moddalar konservant bo'lib, preparatning biologik faolligini saqlanishini ta'minlaydi.

Bundan tashqari, agar bemor gormonni bitta flakondan o'zi ichsa, u holda dori bir necha kun davom etishi mumkin.

Yuqori sifatli antibakterial komponentlar tufayli u mikroblar eritmasida ko'payishning nazariy imkoniyati tufayli foydalanilmagan dori tashlab yuborishga hojat qolmaydi.

Insulin ishlab chiqarishda dezinfektsiyalash vositasi sifatida quyidagi moddalar ishlatilishi mumkin:

Agar eritmada sink ionlari bo'lsa, ular mikroblarga qarshi xususiyatlaridan kelib chiqqan holda qo'shimcha himoya vazifasini bajaradi

Insulinning har bir turini ishlab chiqarish uchun ma'lum dezinfektsiyalash komponentlari mos keladi. Ularning gormon bilan o'zaro ta'siri klinikadan oldingi sinov bosqichida o'rganilishi kerak, chunki konservant insulin biologik faolligini buzmasligi yoki boshqa xususiyatlarga salbiy ta'sir ko'rsatmasligi kerak.

Ko'pgina hollarda konservantlardan foydalanish gormonni spirtli ichimliklar yoki boshqa antiseptiklar bilan oldindan davolamasdan terining ostiga yuborish imkonini beradi (ishlab chiqaruvchi odatda bu ko'rsatmalarga murojaat qiladi).

Bu preparatni qabul qilishni soddalashtiradi va in'ektsiyadan oldin tayyorgarlik manipulyatsiyalarini kamaytiradi.

Ammo bu tavsiya faqat eritma ingichka igna bilan individual insulin shpritsidan foydalangan holda ishlaydi.

Stabilizatorlar

Eritmaning pH darajasi ma'lum darajada saqlanishi uchun stabilizatorlar zarur. Preparatning saqlanishi, uning faoliyati va kimyoviy xususiyatlarining barqarorligi kislotalilik darajasiga bog'liq. Qandli diabet bilan kasallangan bemorlar uchun in'ektsiya gormoni ishlab chiqarishda fosfatlar odatda shu maqsadda ishlatiladi.

Sinkli insulin uchun eritma stabilizatorlari har doim ham kerak emas, chunki metall ionlari kerakli muvozanatni saqlashga yordam beradi.

Agar ular baribir ishlatilmasa, unda fosfatlar o'rniga boshqa kimyoviy birikmalar qo'llaniladi, chunki bu moddalarning birikishi yog'ingarchilik va preparatning yaroqsiz bo'lishiga olib keladi.

Barcha stabilizatorlarga ko'rsatiladigan muhim xususiyat bu xavfsizlik va insulin bilan har qanday reaktsiyaga kirishning mumkin emasligi.

Vakolatli endokrinolog har bir bemor uchun diabetga qarshi dorilarni tanlash bilan shug'ullanishi kerak.

Insulinning vazifasi nafaqat qondagi shakarning normal miqdorini saqlab qolish, balki boshqa organlar va tizimlarga zarar etkazmaslikdir. Preparat kimyoviy jihatdan neytral, past alerjenik va afzal arzon bo'lishi kerak.

Agar tanlangan insulinni amal qilish muddatiga ko'ra boshqa versiyalari bilan aralashtirish mumkin bo'lsa, bu juda qulaydir.

Insulin olish, gen muhandisligi usullari, Biotexnologiya - Kurs ishi

1. Insulinning tuzilishi va vazifalari 5

1.1. 5-insulin molekulasining tuzilishi

1.2. 7. Insulinning biologik ahamiyati

1.3. Insulin biosintezi 8

2. Genetik muhandislik insulin sintezi 10

2.1. Dori vositalarini sintez qilishda genetik muhandislik usullaridan foydalanish 10

2.2. Genetika muhandislik usullari 11

2.3. Genetik muhandislik insulin ishlab chiqarish 14